公豬精液質(zhì)量好壞直接與豬場情期受胎率、產(chǎn)仔數(shù)休戚相關(guān)，所以豬場再怎么強調(diào)公豬精液的重要性都不為過。為研究西南地區(qū)高溫高濕的應(yīng)激環(huán)境下新胺基維他對種公豬精液質(zhì)量的影響，選用16頭成年種公豬按品種配對分3組，對照組4頭，飼喂基礎(chǔ)飼糧，2個試驗組各6頭，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加新胺基維他營養(yǎng)液10mL/頭、20mL/頭。結(jié)果表明，在高溫應(yīng)激環(huán)境條件下，兩個試驗組精子總數(shù)顯著增加（P<0.05），精子畸形率極顯著降低（P<0.01）。采精頻率耐受性試驗結(jié)果表明，20mL/頭新胺基維他組精子總數(shù)沒有出現(xiàn)顯著性減少的變化（P>0.05），而10mL/頭新胺基維他組和對照組均極顯著降低（P<0.01）。說明在種公豬基礎(chǔ)飼糧中添加20mL/頭新胺基維他能顯著增加公豬精子總數(shù)，降低精子畸形率，提高公豬對采精頻率的耐受力，延長精液的保存時間。

新胺基維他；精子；高溫應(yīng)激

品種、營養(yǎng)和環(huán)境三大因素直接影響一個豬場的經(jīng)濟效益，對于種公豬而言，環(huán)境溫度是影響其繁殖性能的首要因素。夏天高溫導(dǎo)致公豬食欲不振，性欲下降，公豬精液品質(zhì)下降，如死精、少精、無精等。生產(chǎn)中通過調(diào)整飼糧蛋白質(zhì)和氨基酸水平、提高能量濃度可減少體增熱，是克服熱應(yīng)激的有效措施之一[1-2]。

本試驗在西南地區(qū)高溫高濕季節(jié)種公豬飼糧中添加一種商品化的抗熱應(yīng)激產(chǎn)品—西班牙海博萊生物大藥廠生產(chǎn)的新胺基維他，研究其在高溫高濕條件下對公豬精液品質(zhì)的影響，以減少高溫對公豬精子生成和精子活力等造成的不良影響。

一、材料與方法

1.1 試驗時間與地點

試驗于2014年7—8月在重慶某原種豬場進行，預(yù)試期7d，正試期42d。

1.2 試驗藥品

新胺基維他營養(yǎng)液由西班牙海博萊生物大藥廠生產(chǎn)，其主要成分：

1.3 試驗設(shè)計

選擇長白公豬、杜洛克公豬和渝榮系公豬共16頭，考慮品種因素將其分成3組，對照組4頭，飼喂基礎(chǔ)飼糧；2個試驗組各6頭，分別在基礎(chǔ)飼糧中添加新胺基維他營養(yǎng)液10mL/頭、20mL/頭?；A(chǔ)飼糧采用大型飼料公司生產(chǎn)的全價公豬飼料。試驗豬自由飲水，每天上午和下午各清理1次豬舍。試驗公豬均是成年且在生產(chǎn)中正常使用的繁殖種公豬。試驗開始每周保持正常的1～2次采精頻率。豬舍采用西南地區(qū)規(guī)模化豬場常用的風(fēng)機-濕簾降溫方式，每天觀察豬的精神狀況，記錄豬舍內(nèi)外溫度、濕度。

1.4 樣品的收集與處理

試驗前樣品的收集：飼喂前3組在同一天內(nèi)進行采精、鏡檢，2000r/min離心20min，取上清液1mL裝于EP管，-20℃冰箱冷凍保存待測。試驗至第6周后開始收集飼喂后精液樣品（同飼喂前樣品收集方法一致）。精液采用BTS稀釋后常溫保存，比較其保存時間的差異。采精耐受性試驗，連續(xù)3d保持每天采精1次，第3天收集的精液采用相同方法處理。

1.5 測定指標

參照國家標準GB23238—2009《種豬常溫精液》方法測定豬的射精量、顏色氣味、精子活力、精子畸形率，精子密度采用血球計數(shù)板測量，然后根據(jù)射精量與精子密度計算每次射精總精子數(shù)。精液收集和檢測均由同一經(jīng)驗豐富的技術(shù)人員負責(zé)；精清生化指標丙二醛（MAD）、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）、睪酮（T）的含量用北京冬歌博業(yè)生物科技有限公司進口分裝的ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗）檢測試劑盒，使用分光光度計進行測定。

1.6 統(tǒng)計分析

試驗數(shù)據(jù)用Excel軟件處理，用SPSS19.0中的配對t檢驗進行顯著性檢驗，結(jié)果以平均值±標準差表示。

二、結(jié)果與分析

2.1 試驗期內(nèi)環(huán)境溫度

由表1可知，舍外溫度平均為31.79℃；豬舍內(nèi)使用濕簾-風(fēng)機降溫系統(tǒng)，平均溫度為29.89℃。舍內(nèi)比舍外溫度低1.9℃。

2.2 新胺基維他對精子總數(shù)、活力和畸形率的影響

試驗收集期精液的顏色與氣味均正常。由表2可以看出，2個試驗組飼喂后精子總數(shù)顯著增加，20mL/頭新胺基維他組增加更為明顯，而對照組沒出現(xiàn)顯著變化；精子活力各組飼喂前后差異不顯著；精子畸形率，10mL/頭新胺基維他組和20mL/頭新胺基維他組飼喂后極顯著降低，而對照組飼喂前后差異不顯著。整體來看，20mL/頭新胺基維他組使用效果更好。

2.3 新胺基維他對精液保存時間的影響

試驗6周后，分別取20mL/頭新胺基維他組和對照組的精液用相同的稀釋保存劑處理后，17℃冰箱保存，每12h對精子活力進行檢測，其活力都出現(xiàn)顯著下降，但20mL/頭新胺基維他組比對照組下降趨勢要緩慢，見表3。

2.4 新胺基維他對采精頻率耐受性的影響

采精頻率耐受性試驗結(jié)果表明，20mL/頭新胺基維他組精子總數(shù)沒有出現(xiàn)顯著性變化，而10mL/頭新胺基維他組和對照組均出現(xiàn)極顯著降低（表4）。

2.5 新胺基維他對精清中生理指標的影響

由表5可知，10mL/頭新胺基維他組和20mL/頭新胺基維他組精清中的丙二醛含量和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性飼喂后均出現(xiàn)降低，而對照組則升高，但飼喂前后均沒有達到顯著水平。而精清中睪酮含量3組飼喂后均升高，但沒有達到顯著水平。

3 討論與結(jié)論

夏季熱應(yīng)激是指動物機體應(yīng)對高溫環(huán)境所產(chǎn)生的非特異性應(yīng)答反應(yīng)的總和，種公豬皮下脂肪較厚，汗腺功能退化，適宜生活的環(huán)境溫度為18～24℃，環(huán)境溫度過高對公豬精液品質(zhì)影響較大，尤其是高溫季節(jié)對其影響特別嚴重，易造成精液品質(zhì)下降，出現(xiàn)死精和無精。高溫使公豬血液中的促腎上腺皮質(zhì)激素水平升高，垂體前葉促性腺激素減少，促甲狀腺分泌減少，從而抑制睪丸產(chǎn)生類固醇，導(dǎo)致公豬的交配欲減退；高溫也會使精細胞發(fā)生變性，致使精液品質(zhì)（射精量、活力、畸形率、密度等）降低，從而使種公豬的生產(chǎn)性能受到嚴重影響，甚至失去生育能力[3]。

張莉等研究發(fā)現(xiàn)，持續(xù)高溫引起的熱應(yīng)激使精子在附睪內(nèi)的運行與成熟受阻，導(dǎo)致射出精液中總精子數(shù)減少，畸形率增高，精液品質(zhì)下降[4]；韓有元對不同溫度下24頭杜洛克公豬的生精功能統(tǒng)計，結(jié)果顯示，溫度越高，精液量、精子密度、精子活力越低，精子畸形率則越高[5]。

隨著養(yǎng)豬業(yè)高度集約化發(fā)展，如何緩解夏季豬只（尤其是種公豬）的熱應(yīng)激是當前養(yǎng)豬業(yè)亟待解決的重要問題。劉煒等[6]研究表明，濕簾-風(fēng)機降溫系統(tǒng)能夠防止公豬熱應(yīng)激，使公豬精液質(zhì)量保持正常，避免夏季高溫對豬場繁殖性能的不利影響。在本試驗期間，舍外最高溫度達到39℃，但豬舍內(nèi)采用規(guī)模豬場較常規(guī)的濕簾-風(fēng)機降溫系統(tǒng)，可以有效減少高溫的影響。

維生素是畜體代謝所必需的一類小分子有機化合物，由于其在動物飼糧中所占比重極少，因而其作用往往被忽視，但幾乎所有的維生素都對種豬的繁殖性能有影響。高溫環(huán)境會造成飼糧中某些維生素氧化變質(zhì)，生物利用率降低。李雪梅等在基礎(chǔ)飼糧中每天額外添加4000IU維生素A，結(jié)果表明，種公豬的采精量、精子密度提高，精子畸形率降低[7]。

李秋鳳在研究飼糧營養(yǎng)調(diào)控對哺乳動物養(yǎng)分消化代謝、泌乳及精液品質(zhì)的影響時發(fā)現(xiàn)，維生素A能夠清除氧自由基、單線態(tài)氧和降低脂質(zhì)過氧化物的產(chǎn)生。維生素E是維持生殖系統(tǒng)正常結(jié)構(gòu)和功能所必需的物質(zhì)，通過垂體前葉分泌促性腺激素，調(diào)節(jié)性機能，從而促進精子的形成與活動[8]。Audet等研究表明，在飼糧中額外添加維生素可以增加精液的產(chǎn)量[9]。

新胺基維他是多種限制性氨基酸和維生素的混合制劑，可以全面高效地補充限制性氨基酸，充分補充關(guān)鍵的維生素A、維生素D3、維生素E、維生素B1和維生素B6，幫助機體對抗各種應(yīng)激等。

本研究在基礎(chǔ)飼糧中分別添加10mL/頭和20mL/頭新胺基維他營養(yǎng)液6周后，精子總數(shù)分別由446.06億個和461.57億個增加到584.47億個和605.92億個，飼喂前后差異達到了顯著水平，并都極顯著降低了精子畸形率。

Brzezińska等認為，精子的氧化損傷是多不飽和脂肪酸在活性氧族產(chǎn)生和清除活動不平衡的結(jié)果，正常情況下，射出精液中清除活性氧族作用的能力依賴于精漿的抗氧化物質(zhì)[2]。丙二醛是機體產(chǎn)生的氧自由基攻擊生物膜中的多不飽和脂肪酸，引發(fā)脂質(zhì)過氧化作用，并因此形成的過氧化物。丙二醛含量的高低間接反應(yīng)了機體細胞受自由基攻擊的嚴重程度[10]。曾新斌在夏季高溫豬飼糧中添加牡蠣粗多糖發(fā)現(xiàn)，其對精液抗氧化指標和種公豬的生精功能有明顯改善作用，丙二醛含量極顯著降低（P<0.01）[11]。睪酮是睪丸間質(zhì)細胞分泌的維持精子發(fā)生的主要激素之一，由間質(zhì)細胞分泌，并經(jīng)淋巴循環(huán)擴散到曲細精管、附睪與輸精管等部位。褚曉紅等研究表明，飼糧中添加硒、維生素E能夠提高豬精液中睪酮含量，并對公豬精子密度和活力有促進作用[12]。

本試驗10mL/頭新胺基維他組和20mL/頭新胺基維他組丙二醛含量和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶活性均降低，反應(yīng)了精子細胞受自由基攻擊程度降低，精子質(zhì)量提高，而對照組出現(xiàn)了升高，但均沒用達到顯著性水平，表明飼喂新胺基維他后精液抗氧化指標和種公豬的生精功能有改善作用。

成年公豬使用中，每周采精次數(shù)一般不能超過3次，如果使用過頻會出現(xiàn)射精量減少，畸形率增高，造成精子受精力下降，如果再繼續(xù)使用，則出現(xiàn)采出的精液無精子現(xiàn)象。阮的樂等研究公豬采精頻率對公豬精液質(zhì)量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，公豬如果長期連續(xù)每2d采1次精會造成34.6%的精液活力在0.7以下[13]。本試驗發(fā)現(xiàn)，20mL/頭新胺基維他組連續(xù)3d每天采精1次的公豬，其第3天精子總數(shù)沒有出現(xiàn)顯著性下降，而對照組和10mL/頭新胺基維他組均出現(xiàn)極顯著降低。本試驗還發(fā)現(xiàn)，20mL/頭新胺基維他組和對照組雖然在常溫保存過程中精子活力都在下降，但其活力降低的速度更緩慢。

本試驗表明，在公豬基礎(chǔ)飼糧中添加20mL/頭新胺基維他能顯著增加公豬精子總數(shù)；降低精子畸形率；提高公豬對采精頻率的耐受力；延長精液的保存時間。