鼻腔是豬群感染病毒或排毒的主要途徑之一，無論在自然感染或者人工造病的條件下，豬群都可以通過鼻腔帶毒和排毒。病毒感染的早期診斷對于豬群疫病的控制至關(guān)重要，因此開展科學(xué)、準(zhǔn)確及可執(zhí)行的監(jiān)測方案勢在必行。

ASF病毒感染途徑的研究發(fā)現(xiàn)，鼻腔拭子的檢測比血液或其他采樣方法更早出現(xiàn)，同時(shí)也具有易采集、可操作性強(qiáng)、對豬群應(yīng)激較小等優(yōu)點(diǎn)，從而成為臨床首選。本文參考文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)合臨床實(shí)際情況，對鼻腔拭子采樣做一介紹：

第一步

準(zhǔn)備鼻拭子采樣材料：保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無菌拭子、記號筆。

第二步

保定豬只，將無菌棉拭子深插入豬只鼻腔內(nèi)，旋轉(zhuǎn)三次，將拭子放入保存管中，記錄豬只信息。

第三步

用無菌注射器注入2ml拭子保存緩沖液，封口，垂直放置，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。

鼻拭子采樣視頻教程：

豬場內(nèi)環(huán)境的樣品采集涉及到固體和液體環(huán)境，結(jié)合生產(chǎn)實(shí)際情況，對豬場內(nèi)環(huán)境樣本采集做一介紹：

一、固體環(huán)境采樣教程

步驟一、

準(zhǔn)備采樣材料：保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、一次性無菌拭子、記號筆。

步驟二、

用無菌注射器向拭管注入2ml保存緩沖液，先浸潤無菌棉拭子。

步驟三、

固體環(huán)境采樣點(diǎn)表面呈井字采樣（詳見視頻），將拭子放入拭管中，記錄采樣信息；封口，垂直放置，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。

二、液體環(huán)境采樣教程

步驟一、

準(zhǔn)備采樣材料：無菌離心管、一次性無菌吸頭、保存緩沖液、封口膠帶、一次性注射器、記號筆。

步驟二、

用無菌注射器向離心管注入4ml保存緩沖液。

步驟三、

用無菌吸頭吸取采樣點(diǎn)液體1ml置于離心管中（詳見視頻）。封口，記錄采樣信息，冷藏保存，48h內(nèi)盡快送檢。

三、豬場內(nèi)環(huán)境建議采樣點(diǎn)

豬場內(nèi)環(huán)境涉及的點(diǎn)和面非常多，以下建議采樣點(diǎn)涉及的主要是常見污染區(qū)域或者需關(guān)注的采樣點(diǎn)，供養(yǎng)殖場參考。

1、物資消毒間：物資消毒架、物資進(jìn)口區(qū)域門把手、腳踏區(qū)域；

2、人員消毒通道：門把手、入口處腳踏區(qū)域；

3、獸藥房：藥房門把手、藥房冰箱門把；

4、工作服：刮取污染的工作服上污染物；

5、雨鞋：刮取雨鞋側(cè)面及鞋底的污染物；

6、內(nèi)部轉(zhuǎn)運(yùn)車輛：輪胎、貨倉、司機(jī)室、腳踏、方向盤、油門及剎車部位；

7、內(nèi)部運(yùn)輸斗車：輪胎、手推把手；

8、飼料加工成品倉出料口：出料口、環(huán)境樣品、飼料袋；

9、豬場內(nèi)門把手：豬舍及獸醫(yī)室等建筑門把手；

10、道路：豬場內(nèi)道路、豬舍內(nèi)道路。

以上監(jiān)測建議頻率為一周一次，各養(yǎng)殖場可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測頻率。

豬場內(nèi)環(huán)境采樣

出豬臺是豬場與外界車輛直接接觸的部位，如果外面售豬車輛洗消不到位，豬場員工裝豬時(shí)，又沒有嚴(yán)格遵循嚴(yán)格的臟凈分離原則，直接將場內(nèi)的豬趕到拉豬車上，就很容易將洗消不徹底的拉豬車上的病毒（包括ASFv、FMDv、PEDv等）帶入生產(chǎn)區(qū)，從而使豬場染上新的疫病，這也是目前豬場最容易出現(xiàn)問題的環(huán)節(jié)。據(jù)調(diào)查了解，ASFv通過離豬場很近的裝豬臺感染機(jī)率有85％的機(jī)會。

目前疫情緊張，在豬場外建獨(dú)立的售豬中轉(zhuǎn)站（或轉(zhuǎn)運(yùn)中心），來避免ASFv的感染是最實(shí)用的辦法之一，可以有效的緩沖疫情的威脅。轉(zhuǎn)運(yùn)中心可以很好避免場內(nèi)工作人員與外界拉豬車輛接觸，人員即使接觸也是場內(nèi)的周轉(zhuǎn)車，而場內(nèi)的周轉(zhuǎn)車輛是嚴(yán)格按要求做好洗消烘干工作再來裝豬的，相對來講全場的生物安全就有了保障，因此轉(zhuǎn)運(yùn)中心現(xiàn)在變成了規(guī)模豬場的必要設(shè)施。

轉(zhuǎn)運(yùn)中心的建設(shè)，是豬場生物安全的重要一部分，而轉(zhuǎn)運(yùn)中心的環(huán)境是否安全關(guān)乎豬場疫病是否發(fā)生，有案例報(bào)道，一養(yǎng)殖場在轉(zhuǎn)運(yùn)中心監(jiān)測到相關(guān)的病原菌，因洗消工作執(zhí)行不到位，20天后該病原菌傳播到豬場?？梢娹D(zhuǎn)運(yùn)中心的洗消工作和環(huán)境安全預(yù)警的重要性，洗消工作可采用低壓沖洗、清潔劑打濕浸泡、熱水高壓清洗、晾干、消毒、烘干等步驟執(zhí)行，環(huán)境安全預(yù)警可定期通過實(shí)驗(yàn)室（按照相關(guān)部門規(guī)定執(zhí)行）監(jiān)測環(huán)境評估。

轉(zhuǎn)運(yùn)中心環(huán)境監(jiān)測包括：外部污區(qū)、轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)及內(nèi)部凈區(qū)三個(gè)部分，本文結(jié)合實(shí)際情況，對轉(zhuǎn)運(yùn)中心環(huán)境采樣做如下預(yù)案：

一、轉(zhuǎn)運(yùn)中心采樣建議

一、采樣區(qū)域

按劃分的三個(gè)區(qū)域進(jìn)行采樣，包括：外部污區(qū)、轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)、內(nèi)部凈區(qū)。

二、采樣示意圖

1.外部污區(qū)

選擇污區(qū)的2個(gè)區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域1的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域2的左下角、右上角采樣。

2.轉(zhuǎn)運(yùn)灰區(qū)

選擇灰區(qū)的2個(gè)區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域3的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域4的左下角、右上角采樣。

3.內(nèi)部凈區(qū)

選擇灰區(qū)的2個(gè)區(qū)域，如圖所示。選擇區(qū)域5的左上角、右下角采樣，選擇區(qū)域6的左下角、右上角采樣。

二、采樣示對象及方法

1.采樣對象：

所選采集區(qū)域的固體表面、或者環(huán)境液體。

2.采樣方法：

采用專用動(dòng)物病毒采樣管套裝，按凈區(qū)→灰區(qū)→污區(qū)順序采樣。

（1）固體表面：使用棉拭子采樣，采用“井”字形法采樣后放入保存管中。

（2）液體環(huán)境：吸取環(huán)境中的液體0.5-1ml，放入保存管中。

3.現(xiàn)場監(jiān)測人員要依照規(guī)范進(jìn)行操作，做好現(xiàn)場記錄。

以上監(jiān)測頻率為一周一次，各轉(zhuǎn)運(yùn)中心可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測頻率。

轉(zhuǎn)運(yùn)中心采樣視頻

在當(dāng)前非洲豬瘟疫情嚴(yán)峻形勢下，豬場需加強(qiáng)生物安全體系建設(shè)，切斷病原傳播鏈條。運(yùn)豬車輛在豬場與豬場之間、豬場與屠宰場之間、豬場與飼料廠之間交叉運(yùn)輸?shù)那闆r很常見，帶來病毒交叉?zhèn)鞑ワL(fēng)險(xiǎn)。

對于豬場來說，豬只和飼料的進(jìn)出都是無法避免的，而負(fù)責(zé)運(yùn)輸?shù)妮d體——車輛，是當(dāng)前交叉污染最突出的問題。被外部污染的車輛與豬場的接觸、流通是病毒從豬場外部進(jìn)入內(nèi)部的主要途徑之一。因此，提高豬場的“運(yùn)輸安全系數(shù)”，使用徹底清洗、消毒和烘干的車輛非常重要。

洗消房是洗消中心的第一道防線，車輛經(jīng)過徹底清潔后，車輛、洗消房內(nèi)部區(qū)域環(huán)境及洗消污水的污染與否，直接反映洗消中心的安全系數(shù)。同時(shí)，當(dāng)前建立的洗消中心多為區(qū)域性共用，洗消中心的安全系數(shù)關(guān)乎是否造成運(yùn)輸車輛的二次污染，是否增加區(qū)域內(nèi)豬場的安全風(fēng)險(xiǎn)。

洗消房的環(huán)境監(jiān)測涉及到車輛、內(nèi)部區(qū)域環(huán)境及污水三個(gè)部分，根據(jù)文獻(xiàn)結(jié)合實(shí)際情況，對洗消中心-洗消房采樣做一建議：

一、車輛采樣建議

一、采樣清單

二、采樣示意圖

（1）示意①

（2）示意②

（3）示意③

（4）示意④

二、洗消房-內(nèi)部區(qū)域環(huán)境采樣建議

一、采樣區(qū)域選擇

原則：所選擇的采樣區(qū)域要具有一定的覆蓋面，越大越好。

建議：取前、中、后三個(gè)區(qū)域，具有覆蓋面，并貼合實(shí)際。

二、采樣示意圖

建議選擇3個(gè)區(qū)域進(jìn)行采樣，如圖所示，包括：進(jìn)入洗消間區(qū)域A、污水道表面區(qū)域B、洗消間區(qū)域C。

區(qū)域A：選擇區(qū)域A的左上角、右下角采樣。

區(qū)域B：選擇區(qū)域B的左下角、右上角采樣。

區(qū)域C：選擇區(qū)域C的左上角、右下角采樣。

三、洗消中心污水采樣建議

一、采樣建議

選擇污水道積水區(qū)域分3個(gè)點(diǎn)（前、中、后）采集積水。

二、采樣示意圖

以上監(jiān)測建議頻率為一周一次，各洗消中心可根據(jù)當(dāng)?shù)匾咔閴毫φ{(diào)整監(jiān)測評率。