豬場(chǎng)病料采集有多種類型，包括鼻拭子，口腔拭子，肛門拭子，血液樣及各類組織樣，當(dāng)前非瘟熒光PCR檢測(cè)使用較多的是鼻拭子、口腔拭子及環(huán)境樣拭子，豬場(chǎng)常規(guī)監(jiān)測(cè)更多的是應(yīng)用ELISA檢測(cè)血液中抗體的變化，如果想做抗原檢測(cè)會(huì)取內(nèi)臟組織樣做PCR檢測(cè)或分離病毒細(xì)菌。采集不同類型的樣品有著不同的方法及注意事項(xiàng)，這里重點(diǎn)介紹血液樣及組織樣的采集及其注意事項(xiàng)。

一、做好人員、物資、運(yùn)輸方面前期的準(zhǔn)備。

要求采樣人員采樣技術(shù)熟練，如無(wú)相關(guān)經(jīng)驗(yàn)最好做簡(jiǎn)單培訓(xùn)再操作；按計(jì)劃采樣時(shí)保鮮袋、自封袋、真空采血管及EP管數(shù)量要充足，同時(shí)最好備有一臺(tái)高速離心機(jī)；采集好的病料要能及時(shí)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室，應(yīng)作好相關(guān)的運(yùn)輸計(jì)劃安排。采樣器、保定繩套等還要注意消毒、運(yùn)輸容器及冰塊也要提前準(zhǔn)備好。要求做好各項(xiàng)準(zhǔn)備工作后再進(jìn)行樣品采集。

1. 一次性注射器（5mL），10 毫升抗凝管，酒精棉球若干（采集血樣）

2. 2mL 離心管，棉簽（2 支/頭），500mL 生理鹽水（采集唾液拭子）

3. 10mL 離心管，淋巴取樣器（1 支/頭），500mL 生理鹽水，酒精棉球若干（采集淋巴）

4. 解剖刀柄（1 把），解剖刀片（1 包）（采集組織樣品）

5. 一次性手套若干雙，乳膠手套若干雙，防護(hù)服若干套、水鞋（1 套/人）， 保定繩（8根），記號(hào)筆3 支

6. 帶冰袋采樣泡沫箱/車載冰箱（1 個(gè)），3%燒堿消毒桶（1 個(gè)），1：200 衛(wèi)可消毒桶（1個(gè)），高于70 度水溫消毒桶（1 個(gè)），75%酒精（500mL），生石灰若干

二、血液樣采集

1 采血前先做好豬只保定。

（1） 保定繩在水溫超過(guò)70 攝氏度的消毒桶先浸泡10 分鐘；

（2） 采樣人員穿上工作服和干凈的水鞋，帶上乳膠手套，外套一次性防護(hù)服；

（3） 人員腳踏3%燒堿消毒桶，進(jìn)入欄舍；

20Kg 以下豬只取仰臥保定，20Kg以上豬只以保定繩套保定，讓豬的胸前凹窩充分暴露。

2 采血。

（1）盡量取前腔靜脈采血：豬前腔靜脈，在第一對(duì)肋骨間的胸腔入口處的氣管腹側(cè)面，由左右兩側(cè)頸靜脈和腋靜脈匯合形成。該血管在一周齡豬直徑約5毫米，成年豬約1厘米以上。采血部位在第一對(duì)肋骨與胸骨柄結(jié)合處直前，但由于左側(cè)靠近隔神經(jīng)，以右側(cè)采血為宜。

豬前腔靜脈采血圖

（2） 選用合適的注射器及針頭

公母豬宜選用16號(hào) 50mm針頭；30kg以上的中大豬，宜選用12號(hào)38mm針頭；10-30kg小豬，可選用9號(hào) 25mm(一次性注射器常配的針頭)；10kg以下仔豬，應(yīng)選擇9號(hào) 20mm針頭。

（3）選準(zhǔn)進(jìn)針的部位

一般來(lái)說(shuō)，30千克以下的小豬應(yīng)采兩前肢與氣管交匯處，種公母豬和30千克以上的中大豬可選頸部最低凹處。進(jìn)針時(shí)又要掌握好一定的方向、角度和深度，要及時(shí)調(diào)整。血管被刺穿，會(huì)引起血腫，要立即停止采血，須換另一頭豬采血。特別要注意的是對(duì)仔豬采血時(shí)，不能太猛、太深，以免傷及心包或心臟。

3 血液樣保存及運(yùn)輸

（1）用真空采血器采集的血樣，直接傾斜放置好。

（2）夏天在常溫下放置一段時(shí)間，冬天要放置在25～37℃溫水中一段時(shí)間，以利于血液中血清的析出。

（3）血樣送檢時(shí)，在保溫箱加適量的冰塊防止血液變質(zhì)，送檢過(guò)程中盡量防止劇烈振蕩。

需要指出的是，血液和血清是完全不同的概念！血清是血液的組成部分，它必須從血液中分離出來(lái)后，才能用于血清學(xué)試驗(yàn)，但這種分離過(guò)程需要專業(yè)人員來(lái)操作。因此，采集的血樣，最好在凝固后，直接送到檢測(cè)單位，以保證血清學(xué)試驗(yàn)的正確進(jìn)行。一般采血2～5毫升就足以滿足實(shí)驗(yàn)室診斷的用量了?！?/span>提示，用于血清學(xué)試驗(yàn)的血樣，不能加任何抗凝血?jiǎng)?/span>】

4、血液樣采集注意事項(xiàng)：

（1）擦拭采血部位的酒精未干，不要立即采血。血液混進(jìn)酒精后易造成溶血（使檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)）；

（2）血液在運(yùn)輸過(guò)程中，防止劇烈展蕩，使血細(xì)胞破裂引起溶血（要注意血液防震）

（3）血液存放的容器要確保干燥。

三、組織樣采集：

（一）疑似豬瘟的病料采集：

1 放血。先把豬腋下動(dòng)脈放血處死。

2 解剖摘取扁桃體。從胸部中線偏右處，切斷肋骨，打開胸腔，在氣管與肺臟連接處向前5～10厘米位置，割斷氣管，并順著氣管向前割開，直至咽喉部，從后向前將氣管割斷一半，這時(shí)就可以在舌跟靠近上腭的左右兩邊看到兩個(gè)淋巴結(jié)，即扁桃體。小心取下扁桃體放置于干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

3 解剖摘取肺門淋巴結(jié)。一只手握住氣管切斷處，使勁向外拉出肺臟，另一只手幫忙扯斷肺臟與身體的連接，并將整個(gè)肺臟翻轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，使背面向上，此時(shí)可在支氣管與肺臟連接處，找到分別位于左右兩側(cè)的兩個(gè)肺門淋巴結(jié)，小心摘取，放置于另一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

4 肺臟樣品的采集。如有必要，可割取部分肺臟樣品，一般只要割取介于病變和正常組織之間的部分，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記，當(dāng)然也可以將整個(gè)肺臟保存。

5 解剖摘取腹股溝淋巴結(jié)。將兩條后腿，向下向外壓，就可以在兩側(cè)凹陷的腹股溝處中間部位，看到微微或明顯的隆起，即腹股溝淋巴結(jié)，小心割開皮膚和淋巴結(jié)表面的被膜，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

6 解剖摘取脾臟。沿腹中線將腹部皮膚、肌肉和腹膜，小心切開并打開腹腔，在腹腔的左側(cè)位于胃和回腸下面，找到脾臟，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

7 解剖摘取腸系膜淋巴結(jié)。從腹腔的右側(cè)位于肝臟和胃下面，找到腸系膜，在腸系膜靠近腸道的末端，可以看到很多結(jié)節(jié)，即腸系膜淋巴結(jié)，小心摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

8 流產(chǎn)胎兒。對(duì)于新鮮流產(chǎn)的胎兒，可作為檢測(cè)樣品。對(duì)于流產(chǎn)日齡較早的胎兒，可取整個(gè)胎兒保存；如果是晚期流產(chǎn)的胎兒，最好根據(jù)上述步驟，摘取相應(yīng)組織，保存送檢。

（二）、疑似藍(lán)耳病病例的病料采集：

具體病料采集程序與豬瘟病料的采集基本一致（包括步驟1、3至6、8），需要強(qiáng)調(diào)的是，在藍(lán)耳病的檢測(cè)中，必須包括淋巴結(jié)和肺臟樣本！如果檢測(cè)流產(chǎn)胎兒，那么，最好能剪取部分胎衣液或剪取胎衣樣本，保存方法同上。

（三）、疑似圓環(huán)病毒感染病例的病料采集：

對(duì)于疑似圓環(huán)病毒感染的病例，病料采集包括步驟1、3至7。記住，在圓環(huán)病毒的檢測(cè)中，必須包括淋巴結(jié)樣品。

（四）、疑似偽狂犬病病例的病料采集：

因偽狂犬病病毒可危害呼吸系統(tǒng)、繁殖系統(tǒng)或中樞神經(jīng)系統(tǒng)，因此，病料采集包括步驟1至8。同時(shí)，還要采集神經(jīng)系統(tǒng)的樣品。具體步驟為用手術(shù)刀片將豬的頭皮剝?nèi)ィ冻鲱^蓋骨，然后用鑿子（也可用一字螺絲刀），輕輕鑿開頭蓋骨，并清理骨頭碎片，等整個(gè)大腦露出后，小心用手摘取，放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

（五）、疑似流行性腹瀉病例的病料采集：

本病的病料采集，包括步驟1、5、7。同時(shí)需要采集腸道樣品。從腹腔中剪取病變的小腸10～15厘米，從一側(cè)將腸道剪開，輕輕刮去腸道內(nèi)容物，然后放置于一個(gè)干凈的保鮮袋中，并做標(biāo)記。

（六）疑似流感病例的病料采集：

按照上述方法采集肺臟和淋巴結(jié)即可。

（七）檢測(cè)病料的運(yùn)輸注意事項(xiàng)：

（1）死亡的豬應(yīng)盡快采集，夏天不應(yīng)超過(guò)2小時(shí)，冬天不超過(guò)6小時(shí)。

（2）采集豬的病料必須新鮮，要采集有病變部位的材料，盡可能減少污染。

（3）用于檢驗(yàn)的內(nèi)臟組織塊不必太大。但取樣要有代表性 對(duì)每一器官，應(yīng)在各個(gè)不同部位多取幾塊組織，并且病變部分應(yīng)盡量附帶一些周圍的健康組織。

（4）無(wú)論是運(yùn)送新鮮的病料還是冰凍的病料，保證整個(gè)過(guò)程中，病料始終處于低溫狀態(tài)。

（5）送檢過(guò)程中要防止傾倒、破碎、避免樣品泄漏，要注意有的樣品不能劇烈展蕩，要注意緩沖放置，所有樣品都要貼上能標(biāo)示采樣豬的詳細(xì)標(biāo)簽。