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 2025年04月04日 星期五 10時(shí)10分
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什么是S/P值?如何解讀?

放大字體  縮小字體🕓2021-05-07  來源:🔗養(yǎng)豬職業(yè)經(jīng)理人  💛10096

豬場在做抗體檢測時(shí),往往會得到一個(gè)S/P值。什么是S/P值?S/P值是酶聯(lián)免疫吸附檢測的一種結(jié)果報(bào)告形式。這里先簡單介紹一下什么是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)

檢測抗體的方法有很多,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是最常用的。酶聯(lián)免疫吸附法檢測抗體的基本原理是:

先在反應(yīng)容器的表面(微孔板)附著上需要檢測的抗體的特異性抗原,用來捕獲受測樣本中的抗體。把受測樣本注入微孔后,樣本中的抗體就會被之前加入的抗原捕獲在容器表面。

沖洗掉其他東西,剩下的就是沒用完的抗原和捕獲了抗體的抗原。這個(gè)時(shí)候當(dāng)然不能直接去數(shù)有多少個(gè)抗體,因?yàn)榭贵w太小了,是一個(gè)很弱的檢測信號,需要把這個(gè)信號放大。而酶就是那個(gè)信號放大器。

把酶連接在所測抗體的抗體上(抗抗體)構(gòu)成酶標(biāo)抗體,把酶標(biāo)抗體加入剛才的反應(yīng)容器,同樣的原理,酶標(biāo)抗體會被抗體捕獲。沒被捕獲的酶標(biāo)抗體也會被沖洗掉。這個(gè)時(shí)候再加入顯色液,顯色液在酶的作用下會變色,被捕獲的酶標(biāo)抗體越多,顏色越深。通過這種方法間接的實(shí)現(xiàn)了對抗體的有無和多少進(jìn)行了顯示。

此時(shí)可以用肉眼直接觀察,但是如果要精確測量就需要用到一個(gè)比色計(jì)(酶標(biāo)儀)。比色計(jì)的原理是向樣品孔中照射特定波長的光,測量有多少光波被吸收,就能得到每個(gè)樣品孔的吸光度的值。

什么是S/P值?

這個(gè)吸光度值與抗體濃度存在一一對應(yīng)的關(guān)系,因此只需要找到這個(gè)關(guān)系就可以把吸光度值轉(zhuǎn)化成抗體的濃度值。

一種方法是,把陽性標(biāo)準(zhǔn)品做梯度稀釋,然后把不同稀釋濃度的吸光度值做一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)曲線,然后拿樣品的吸光度值去曲線上比對,就能夠獲得樣品中抗體的濃度數(shù)值。

當(dāng)然還有更簡便的方法,即不做梯度稀釋,直接用樣品的吸光度值跟特定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品吸光度值進(jìn)行比對。這也就是S/P值方法。

S/P值是一個(gè)比值。即S——Sample樣本的吸光度值,比,P——Positive陽性對照的吸光度值。下面是完整公式:

S/P = (樣本值-陰性對照值)/(陽性對照值-陰性對照值)

所以,如果S/P ≥ 1 時(shí),當(dāng)然肯定是陽性,說明樣本中抗體的濃度等于或超過了陽性對照的濃度。S/P的值越大,抗體濃度越高。

如果S/P<1,可能會稍微復(fù)雜一些,小于1說明樣品中的抗體量小于陽性對照的量,但是少多少才算陰性?所以這個(gè)時(shí)候就需要用一個(gè)分界值來判定。這個(gè)分界值,一般需要廠家測量之后根據(jù)敏感度和特異度進(jìn)行制定,比如多數(shù)廠家藍(lán)耳病抗體的臨界值設(shè)置為0.4,也就是當(dāng)S/P < 0.4 則可以判定為陰性,如果S/P>0.4則判定為陽性。

主要參考來源:

https://www.immunology.org/public-information/bitesized-immunology/experimental-techniques/enzyme-linked-immunosorbent-assay

https://en.wikipedia.org/wiki/ELISA

編輯:劉金娥

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