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什么是S/P值?如何解讀?

放大字體  縮小字體🕓2021-05-07  來源:🔗養(yǎng)豬職業(yè)經理人  💛9939
核心提示:豬場在做抗體檢測時,往往會得到一個S/P值。什么是S/P值?S/P值是酶聯免疫吸附檢測的一種結果報告形式。這里先簡單介紹一下什么

豬場在做抗體檢測時,往往會得到一個S/P值。什么是S/P值?S/P值是酶聯免疫吸附檢測的一種結果報告形式。這里先簡單介紹一下什么是酶聯免疫吸附試驗。

酶聯免疫吸附試驗(ELISA)

檢測抗體的方法有很多,酶聯免疫吸附試驗是最常用的。酶聯免疫吸附法檢測抗體的基本原理是:

先在反應容器的表面(微孔板)附著上需要檢測的抗體的特異性抗原,用來捕獲受測樣本中的抗體。把受測樣本注入微孔后,樣本中的抗體就會被之前加入的抗原捕獲在容器表面。

沖洗掉其他東西,剩下的就是沒用完的抗原和捕獲了抗體的抗原。這個時候當然不能直接去數有多少個抗體,因為抗體太小了,是一個很弱的檢測信號,需要把這個信號放大。而酶就是那個信號放大器。

把酶連接在所測抗體的抗體上(抗抗體)構成酶標抗體,把酶標抗體加入剛才的反應容器,同樣的原理,酶標抗體會被抗體捕獲。沒被捕獲的酶標抗體也會被沖洗掉。這個時候再加入顯色液,顯色液在酶的作用下會變色,被捕獲的酶標抗體越多,顏色越深。通過這種方法間接的實現了對抗體的有無和多少進行了顯示。

此時可以用肉眼直接觀察,但是如果要精確測量就需要用到一個比色計(酶標儀)。比色計的原理是向樣品孔中照射特定波長的光,測量有多少光波被吸收,就能得到每個樣品孔的吸光度的值。

什么是S/P值?

這個吸光度值與抗體濃度存在一一對應的關系,因此只需要找到這個關系就可以把吸光度值轉化成抗體的濃度值。

一種方法是,把陽性標準品做梯度稀釋,然后把不同稀釋濃度的吸光度值做一個標準曲線,然后拿樣品的吸光度值去曲線上比對,就能夠獲得樣品中抗體的濃度數值。

當然還有更簡便的方法,即不做梯度稀釋,直接用樣品的吸光度值跟特定濃度的標準品吸光度值進行比對。這也就是S/P值方法。

S/P值是一個比值。即S——Sample樣本的吸光度值,比,P——Positive陽性對照的吸光度值。下面是完整公式:

S/P = (樣本值-陰性對照值)/(陽性對照值-陰性對照值)

所以,如果S/P ≥ 1 時,當然肯定是陽性,說明樣本中抗體的濃度等于或超過了陽性對照的濃度。S/P的值越大,抗體濃度越高。

如果S/P<1,可能會稍微復雜一些,小于1說明樣品中的抗體量小于陽性對照的量,但是少多少才算陰性?所以這個時候就需要用一個分界值來判定。這個分界值,一般需要廠家測量之后根據敏感度和特異度進行制定,比如多數廠家藍耳病抗體的臨界值設置為0.4,也就是當S/P < 0.4 則可以判定為陰性,如果S/P>0.4則判定為陽性。

主要參考來源:

https://www.immunology.org/public-information/bitesized-immunology/experimental-techniques/enzyme-linked-immunosorbent-assay

https://en.wikipedia.org/wiki/ELISA

 編輯:劉金娥

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