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 2025年04月04日 星期五 12時(shí)20分
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實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)解釋常犯的七類錯(cuò)誤(1)

放大字體  縮小字體🕓2021-05-18  來源:🔗養(yǎng)豬職業(yè)經(jīng)理人  💛3954

原文名:Common Mistakes in Interpretation ofPopulation Serology

著者:Gregory W. Stevenson

如何有效利用群體血清學(xué)數(shù)據(jù)是很復(fù)雜的,需要預(yù)防獸醫(yī)對(duì)體液免疫應(yīng)答、血清學(xué)試驗(yàn)類型及其總體敏感性和特異性、豬群中特異性傳染因素的流行病學(xué)和統(tǒng)計(jì)學(xué)有基本了解。過去的 10 年,在雜志和會(huì)議論文集中有關(guān)這些論題的綜述性文章超過 40 篇之多。最全面的七個(gè)方面列于諸多文獻(xiàn)中,以下是核心概念內(nèi)容大綱。

錯(cuò)誤 1:缺乏對(duì)基本概念理解,試圖應(yīng)用/解釋血清學(xué)數(shù)據(jù)

血清學(xué)試驗(yàn)僅測試體內(nèi)循環(huán)抗體,并不能測定細(xì)胞介導(dǎo)的免疫;

主要的循環(huán)抗體有兩類:即 IgG 和 IgM;

IgM 抗體出現(xiàn)早,達(dá)到峰值早,消失相對(duì)快;

IgG 抗體出現(xiàn)要遲,達(dá)到峰值也晚,在血清中存在的時(shí)間要長得多;

豬只通過免疫接種或感染后,初次與抗原接觸產(chǎn)生原發(fā)性應(yīng)答反應(yīng);

與各種抗原再次接觸后導(dǎo)致更迅速和持續(xù)時(shí)間更長的明顯二次應(yīng)答反應(yīng);

但不是所有類型的血清學(xué)試驗(yàn)均能同樣地測定 IgG 和 IgM 抗體;

在檢測 IgM 和 IgG 抗體類別中,選擇性血清學(xué)試驗(yàn)的效力

IgM

IgG

凝集反應(yīng)

補(bǔ)體結(jié)合反應(yīng)

病毒中和試驗(yàn)

沉淀反應(yīng)

血凝抑制試驗(yàn)

ELISA**

免疫熒光抗體**

**試驗(yàn)可以設(shè)計(jì),以檢測一種或兩種類型。

檢測主要是 IgM 的試驗(yàn)中出現(xiàn)較高的效價(jià),說明新近感染或免疫接種。由于 IgG 的持續(xù)期長,在檢測 IgG 的試驗(yàn)中出現(xiàn)較高效價(jià)時(shí),就不能肯定得出同樣的結(jié)論。

某些試驗(yàn)的設(shè)計(jì)會(huì)影響特異性而不是簡單地僅檢測抗體的類型;由于這個(gè)緣故,人們應(yīng)當(dāng)總是盡量了解所用的每種血清學(xué)試驗(yàn)在特異性和敏感性方面的實(shí)際局限性。例如,檢查豬肺炎支原體的DAKO ELISA 試驗(yàn)采用針對(duì)豬肺炎支原體的單個(gè)蛋白表位的單克隆抗體,為了檢測豬肺炎支原體野外菌株感染的抗體,而不檢測其它密切相關(guān)的非病原性支原體如絮狀支原體的抗體。遺憾地是,有些預(yù)防肺炎支原體非常有效的疫苗,誘發(fā)在本試驗(yàn)中的靶表位的血清學(xué)應(yīng)答并不高,這意味著DAKO 試驗(yàn)在許多疫苗免疫的動(dòng)物中為陰性,而吐溫 20 ELISA 對(duì)豬肺炎支原體仍為陽性。因此, DAKO 試驗(yàn)用于監(jiān)測豬肺炎支原體野外菌株感染是理想的,但無法確定用相同疫苗免疫接種的反應(yīng);

在動(dòng)物群體中,不同個(gè)體之間的體液免疫應(yīng)答強(qiáng)度有生物學(xué)的差異,就是說對(duì)相同抗原刺激產(chǎn)生的最高效價(jià)并不相同。

試驗(yàn)敏感性是指檢測具有特異性抗體(真正陽性)動(dòng)物時(shí)試驗(yàn)的效力。就是說具有高度敏感性試驗(yàn),很少有假陰性;

試驗(yàn)特異性是指檢測缺乏特異性抗體(真正陰性)動(dòng)物時(shí)試驗(yàn)的效力。就是說具有高度特異性試驗(yàn),很少有假陽性;

試驗(yàn)特異性和敏感性是相互矛盾的,就是說高度敏感性試驗(yàn)常缺乏特異性而高度特異性試驗(yàn)常缺乏敏感性。

許多血清學(xué)試驗(yàn)隨時(shí)間不同,敏感性方面具有內(nèi)在變異性,因此,要比較多份血清樣本的效價(jià)話,應(yīng)在同一實(shí)驗(yàn)室、同一天中處理同一批試驗(yàn)的樣品。

一種陽性的試驗(yàn)?zāi)軝z測特異性抗體并且能提出以前或目前的感染、以往的免疫接種,沒有非特異性反應(yīng)(假陽性)或與抗原性有關(guān)微生物的交叉反應(yīng);

一種陰性的試驗(yàn)表明特異性抗體低于試驗(yàn)敏感性檢測的水平,一個(gè)陰性試驗(yàn)并不總是表明缺乏感染或未有以往感染。

新近感染的動(dòng)物可能為血清學(xué)陰性,因?yàn)樗鼈冞€沒有發(fā)生血清轉(zhuǎn)陽。對(duì)一個(gè)敏感的試驗(yàn),例如 IDEXX 公司用于檢測 PRRS 的ELISA(感染后 9 天才能檢出血清轉(zhuǎn)陽)就會(huì)出現(xiàn)這種情況。對(duì)一個(gè)敏感性較低的試驗(yàn),如檢測豬肺炎支原體的吐溫 20-ELISA,感染后至少2~3 周才出現(xiàn)血清轉(zhuǎn)陽。

有些傳染因子的攜帶者也會(huì)發(fā)生血清轉(zhuǎn)陽,在粘膜表面的細(xì)菌感染可能不會(huì)誘導(dǎo)某些動(dòng)物的體液免疫應(yīng)答,如胸膜肺炎放線桿菌的低水平帶菌豬。偽狂犬病毒和其它皰疹病毒可以發(fā)生潛伏,在體液抗體衰減后,潛伏帶菌豬可能會(huì)血清轉(zhuǎn)陰。由某些因子引起的子宮內(nèi)感染,可以導(dǎo)致終生持續(xù)性感染和免疫耐受。

(未完待續(xù))

編輯:劉金娥

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