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實驗室血清學解釋常犯的七類錯誤(1)

放大字體  縮小字體🕓2021-05-18  來源:🔗養(yǎng)豬職業(yè)經(jīng)理人  💛3535
核心提示:原文名:Common Mistakes in Interpretation ofPopulation Serology著者:Gregory W. Stevenson如何有效利用群體血清學數(shù)據(jù)是很

原文名:Common Mistakes in Interpretation ofPopulation Serology

著者:Gregory W. Stevenson

如何有效利用群體血清學數(shù)據(jù)是很復雜的,需要預防獸醫(yī)對體液免疫應答、血清學試驗類型及其總體敏感性和特異性、豬群中特異性傳染因素的流行病學和統(tǒng)計學有基本了解。過去的 10 年,在雜志和會議論文集中有關這些論題的綜述性文章超過 40 篇之多。最全面的七個方面列于諸多文獻中,以下是核心概念內(nèi)容大綱。

錯誤 1:缺乏對基本概念理解,試圖應用/解釋血清學數(shù)據(jù)

血清學試驗僅測試體內(nèi)循環(huán)抗體,并不能測定細胞介導的免疫;

主要的循環(huán)抗體有兩類:即 IgG 和 IgM;

IgM 抗體出現(xiàn)早,達到峰值早,消失相對快;

IgG 抗體出現(xiàn)要遲,達到峰值也晚,在血清中存在的時間要長得多;

豬只通過免疫接種或感染后,初次與抗原接觸產(chǎn)生原發(fā)性應答反應;

與各種抗原再次接觸后導致更迅速和持續(xù)時間更長的明顯二次應答反應;

但不是所有類型的血清學試驗均能同樣地測定 IgG 和 IgM 抗體;

在檢測 IgM 和 IgG 抗體類別中,選擇性血清學試驗的效力

IgM

IgG

凝集反應

補體結(jié)合反應

病毒中和試驗

沉淀反應

血凝抑制試驗

ELISA**

免疫熒光抗體**

**試驗可以設計,以檢測一種或兩種類型。

檢測主要是 IgM 的試驗中出現(xiàn)較高的效價,說明新近感染或免疫接種。由于 IgG 的持續(xù)期長,在檢測 IgG 的試驗中出現(xiàn)較高效價時,就不能肯定得出同樣的結(jié)論。

某些試驗的設計會影響特異性而不是簡單地僅檢測抗體的類型;由于這個緣故,人們應當總是盡量了解所用的每種血清學試驗在特異性和敏感性方面的實際局限性。例如,檢查豬肺炎支原體的DAKO ELISA 試驗采用針對豬肺炎支原體的單個蛋白表位的單克隆抗體,為了檢測豬肺炎支原體野外菌株感染的抗體,而不檢測其它密切相關的非病原性支原體如絮狀支原體的抗體。遺憾地是,有些預防肺炎支原體非常有效的疫苗,誘發(fā)在本試驗中的靶表位的血清學應答并不高,這意味著DAKO 試驗在許多疫苗免疫的動物中為陰性,而吐溫 20 ELISA 對豬肺炎支原體仍為陽性。因此, DAKO 試驗用于監(jiān)測豬肺炎支原體野外菌株感染是理想的,但無法確定用相同疫苗免疫接種的反應;

在動物群體中,不同個體之間的體液免疫應答強度有生物學的差異,就是說對相同抗原刺激產(chǎn)生的最高效價并不相同。

試驗敏感性是指檢測具有特異性抗體(真正陽性)動物時試驗的效力。就是說具有高度敏感性試驗,很少有假陰性;

試驗特異性是指檢測缺乏特異性抗體(真正陰性)動物時試驗的效力。就是說具有高度特異性試驗,很少有假陽性;

試驗特異性和敏感性是相互矛盾的,就是說高度敏感性試驗常缺乏特異性而高度特異性試驗常缺乏敏感性。

許多血清學試驗隨時間不同,敏感性方面具有內(nèi)在變異性,因此,要比較多份血清樣本的效價話,應在同一實驗室、同一天中處理同一批試驗的樣品。

一種陽性的試驗能檢測特異性抗體并且能提出以前或目前的感染、以往的免疫接種,沒有非特異性反應(假陽性)或與抗原性有關微生物的交叉反應;

一種陰性的試驗表明特異性抗體低于試驗敏感性檢測的水平,一個陰性試驗并不總是表明缺乏感染或未有以往感染。

新近感染的動物可能為血清學陰性,因為它們還沒有發(fā)生血清轉(zhuǎn)陽。對一個敏感的試驗,例如 IDEXX 公司用于檢測 PRRS 的ELISA(感染后 9 天才能檢出血清轉(zhuǎn)陽)就會出現(xiàn)這種情況。對一個敏感性較低的試驗,如檢測豬肺炎支原體的吐溫 20-ELISA,感染后至少2~3 周才出現(xiàn)血清轉(zhuǎn)陽。

有些傳染因子的攜帶者也會發(fā)生血清轉(zhuǎn)陽,在粘膜表面的細菌感染可能不會誘導某些動物的體液免疫應答,如胸膜肺炎放線桿菌的低水平帶菌豬。偽狂犬病毒和其它皰疹病毒可以發(fā)生潛伏,在體液抗體衰減后,潛伏帶菌豬可能會血清轉(zhuǎn)陰。由某些因子引起的子宮內(nèi)感染,可以導致終生持續(xù)性感染和免疫耐受。

(未完待續(xù))

 編輯:劉金娥

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