非洲豬瘟

JoséManuelSánchez‐Vizcaíno,AlbertoLaddomada,andMarisaL

背景

全球非洲豬瘟歷史回顧

第一次報(bào)道非洲豬瘟是在1921年的肯尼亞，當(dāng)時(shí)該病(ASFV)從非洲野豬傳給家豬，造成100%豬只死亡(Montgomery,1921)。從這以來(lái)， ASFV已三次傳出非洲。

第一次發(fā)生在1957年，從安哥拉到達(dá)葡萄牙的里斯本(Manso-Ribeiro等,1958年)。

第二次(1960)是從非洲到葡萄牙里斯本,然后到西班牙和其他歐洲國(guó)家,包括法國(guó)(1964)、意大利(1967、1969)、撒丁島(1978)、馬耳他(1978)、比利時(shí)(1985年)和荷蘭(1986年)。ASFV從歐洲蔓延到拉丁美洲，包括古巴(1971、1980)、巴西(1978)、多米尼加共和國(guó)(1978)和海地(1979)。隨后,除了葡萄牙、西班牙外和撒丁島外，其它國(guó)家都根除了ASFV。葡萄牙和西班牙在1995年之前一直處于地方性流行；撒丁島至今仍是地方性流行。

第三次ASFV傳出非洲發(fā)生于2007年,這一次到達(dá)了高加索地區(qū),并蔓延至俄羅斯聯(lián)邦(2007)、烏克蘭(2012)、白俄羅斯(2013)，于2014年到達(dá)波羅的海區(qū)域和波蘭,于2017年和2018年向西傳播到中歐和西歐。2018年8月,ASF首次報(bào)道發(fā)生在中國(guó)。所有這些國(guó)家目前仍然處于感染狀態(tài)。（紅色標(biāo)識(shí)為《豬病學(xué)》第10版所沒(méi)有得內(nèi)容）

目前ASFV的流行狀況嚴(yán)重威脅動(dòng)物健康和生豬生產(chǎn)，對(duì)感染國(guó)家和鄰近國(guó)家的經(jīng)濟(jì)造成損失。ASFV在非洲大陸許多撒哈拉以南地區(qū)仍然處于地方性流行。

公共衛(wèi)生

ASFV不感染人，不會(huì)對(duì)公共衛(wèi)生造成直接危害(EFSA,2009)。但是,ASFV對(duì)豬及豬產(chǎn)品的交易和食品安全，特別是那些以豬肉作為主要蛋白來(lái)源的國(guó)家造成嚴(yán)重的社會(huì)和經(jīng)濟(jì)影響。

病因?qū)W

ASFV是一個(gè)復(fù)雜的二十面體DAN病毒，是非洲豬瘟病毒科，非洲豬瘟病毒屬的唯一成員(Dixon等，2005)。該病毒由四層同心軸結(jié)構(gòu)和一個(gè)六角形外膜組成(圖25.1)，六角形外膜由病毒穿過(guò)細(xì)胞膜出芽時(shí)形成(Salas和Andrés,2013)。ASFV復(fù)制主要發(fā)生在受感染巨噬細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,雖然細(xì)胞核內(nèi)也發(fā)現(xiàn)了病毒的早期復(fù)制。

病毒基因組的長(zhǎng)度從170kb到193kb不等，包含150–167開(kāi)放閱讀框架?；蚪M由一個(gè)125kb左右的保守中心區(qū)域和兩個(gè)編碼五個(gè)多基因家族（MGFs）的可變末端組成(Ya?ez等,1995年)。MGFs中長(zhǎng)達(dá)20kb的區(qū)域，是基因刪除和插入的區(qū)域，這些區(qū)域可能有助于產(chǎn)生抗原變異,從而幫助ASFV逃避宿主免疫系統(tǒng)。

病毒基因型和亞型是根據(jù)保守中心區(qū)的的中心可變區(qū)(CVR)中的微小變化來(lái)區(qū)分的。完整的基因組序列適用于目前15株非洲和歐洲ASFV分離株,這些毒株來(lái)自不同的地區(qū)和宿主(家豬、疣豬和軟蜱)。這些分離毒株表現(xiàn)出不同程度的毒力和明顯的遺傳差異(DeVilliers,2010)。MGF區(qū)域內(nèi)的序列變化,與巨噬細(xì)胞的毒力水平和與軟蜱的宿主范圍有關(guān)(Burrage等,2004;Zsak等,2001)。

ASF病毒粒子極其復(fù)雜:雙向電泳表明細(xì)胞內(nèi)至少有28個(gè)結(jié)構(gòu)蛋白顆粒,細(xì)胞外至少有54種純化蛋白顆粒。超過(guò)100種病毒誘導(dǎo)蛋白質(zhì)從被感染的豬巨噬細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)(Esteves等1986)。黏附蛋白p12和p24在病毒粒子的細(xì)胞外膜發(fā)現(xiàn)，而蛋白p150、p37、p34和p14位于病毒核內(nèi)。病毒外膜還包含血凝素(HA)蛋白(細(xì)胞的病毒同源體，CD2),病毒中唯一已知的糖蛋白。某些ASFV蛋白具有高度抗原性,包括病毒衣殼的主要結(jié)構(gòu)成分(P72)以及膜蛋白(P54、P30和P12)。

圖 25.1 ASFV病毒粒子的電子顯微鏡。來(lái)源：由 CBM-CSIC-UAM 提供

50多種病毒蛋白在感染豬或康復(fù)豬誘導(dǎo)抗體反應(yīng)。它們?cè)谘鍖W(xué)診斷是有用的抗原,雖然其誘導(dǎo)的保護(hù)免疫還不清楚(Neilan等,2004)。

ASFV不能誘導(dǎo)完全的中和抗體免疫反應(yīng),導(dǎo)致無(wú)法根據(jù)血清型進(jìn)行分類。但是基于P27基因的部分核酸序列，ASFV可分為24種基因型(Achenbach等,2017;Quembo等,2017)。亞型是根據(jù)B602L基因內(nèi)的CVR的串聯(lián)重復(fù)序列的分析來(lái)區(qū)別(Nix等,2006)，同樣根據(jù)基因組右端的I73R和I329L基因也可以進(jìn)行亞型的分類(Gallardo等,2014)。編碼p54、p30或HA的基因組可運(yùn)用于病毒跟蹤。

所有24種已知的ASFV基因型都已在撒哈拉以南的非洲確認(rèn)(Achenbach等,2017;Quembo等,2017年)。2006年之前在歐洲和西半球檢測(cè)到的ASFV分離株僅限于基因I型，來(lái)自西非。2007年,在歐洲整個(gè)高加索地區(qū)，檢測(cè)到了來(lái)自非洲東南部新的ASFV基因II型(EFSA,2010)。

ASFV在pH值4–10下，在無(wú)血清培養(yǎng)基中保持穩(wěn)定, 但pH值低于4或者高于11.5，病毒幾分鐘內(nèi)就會(huì)被滅活(EFSA, 2010)。該病毒在 5°c (41°F)血清中下可保持存活6年，并能在PH 值13.4條件下，25% 的血清培養(yǎng)基下存活數(shù)日。ASFV 通過(guò)加熱在60°c (140°F) 30分鐘 (Plowright和 Parker,1967)或 56°c (133°F) 70分鐘(Mebus,1988)可被滅活。許多有機(jī)溶劑可以通過(guò)破壞囊膜使病毒失活，但ASFV能夠抵抗蛋白酶和核酸酶降解 (Plowright 和 Parker,1967)。

ASFV田間分離毒株必須通過(guò)豬的單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞分離鑒定，病毒在普通細(xì)胞中不能復(fù)制。為了研究目的，多株ASFV已經(jīng)在非洲綠猴腎穩(wěn)定細(xì)胞系中適應(yīng)生長(zhǎng)，包括VERO、MS 和 CV‐1細(xì)胞。最近，多個(gè)豬單核細(xì)胞起源的細(xì)胞系已經(jīng)開(kāi)發(fā)用于研究(Chitko-mckown 等, 2013;Hurtado 等, 2010)。例如, COS‐1細(xì)胞系是已用于田間分離株的檢測(cè)、生長(zhǎng)和滴度測(cè)定，以及實(shí)驗(yàn)室工程ASFV毒株傳代。盡管取得了這一進(jìn)展, 但合適的細(xì)胞系尚未分離或開(kāi)發(fā)出來(lái)，病毒或潛在的實(shí)驗(yàn)疫苗可以在其中復(fù)制的細(xì)胞系, 而無(wú)需改變其基因組的免疫原性。這仍然是 ASFV 研究和疫苗研發(fā)的一個(gè)重大障礙。

（未完待續(xù)）