題目:后備母豬PRRSV血清馴化

摘要:
馴化方案包括血清暴露和恢復兩個步驟。陰性后備母豬在到達后第5天肌注選定動物的血清。在實施后備母豬血清馴化1年后,母豬群血清陽性率顯著降低(P<0.05)。所有保育豬均為PRRSV陰性。ELISA結果顯示,在完全獨立的育肥場PRRSV陽性率顯著降低(P<0.05),所有豬只在實驗結束時均為陰性。在部分獨立的育肥場,出現了持續(xù)的血清轉化(P>0.05)。綜上所述,后備母豬血清馴化實現了母豬群的穩(wěn)定,確保繁殖場能生產陰性斷奶豬,使PRRSV做到完全根除。

研究豬群位于墨西哥索諾拉,由5000頭母豬組成的多地點生產系統。保育場和育肥場位于繁殖場幾英里遠的地方。每個保育場能夠存放4000頭仔豬,按1個生產組計算。
為了實現相互獨立,每一個生產組豬只從保育場轉移到育肥場(距離保育場>3英里)。這個生產系統只包括了80%的場被歸類為完全獨立的。另外20%的場為未完全獨立,因為保育場和育肥場位于相同的位置,共享相同的區(qū)域和人員。

該生產系統自1994年以來就感染了PRRSV。在保育豬和育肥豬中觀察到與PRRSV感染相關的繁殖和呼吸癥狀以及死亡率的增加。血清學證實了藍耳病病毒的存在。在最初爆發(fā)后的母豬群中,母豬反復感染很明顯。
1999年,豬場開始了一項后備母豬馴化計劃,包括從保育豬和育肥豬中進行血清馴化。在開始馴化前和馴化過程中,母豬群接種了丹毒、細小病毒、鉤端螺旋體和肺炎支原體疫苗。

馴化方案包括將母豬暴露在感染環(huán)境中,然后再讓其逐漸康復,當后備母豬被引入母豬群時,先進行馴化,防止PRRSV感染和擴散,從而進一步控制保育和育肥豬群中藍耳病的流行。
馴化單元被安置在一個獨立的地方,遠離母豬場。兩個通風良好的豬舍用來飼養(yǎng)后備母豬,該單元實施全進全出管理。每個更新組由350頭18至22周齡的后備母豬組成。每5周給母豬群轉一批后備母豬(計劃每年10批)。根據PRRSV排毒時間(9-11周多見)和持續(xù)性時間長的(12周)規(guī)律,母豬感染后至少在這個單位呆10周。

用生產上病弱的保育豬和育肥豬,作為PRRSV的來源。選擇的豬只日齡在8-12周齡之間,基于每月血清學調查(n=30)以及以前記錄的信息。
通過前腔靜脈抽取血液,并低速850×g離心10分鐘收集血清。添加了抗生素以避免污染。

PRRSV陰性后備母豬在到達后第5天每頭肌注1mL血清。馴化前5天和馴化后2周(19 d)分別飼喂添加藥物的飼料(600 ppm金霉素)。
在馴化后第0、35和63天對每個批后備母豬進行血清學檢查,每批后備母豬的樣品量為30頭。這樣做是為了確定馴化結果和馴化結束時的恢復狀況。采用血清樣本采用ELISA進行檢測,每日進行臨床觀察(發(fā)熱和檢測)。采用重復測量方差分析(ANOVA)對后備母豬平均S:P進行統計分析。

在感染后35天,后備母豬血清轉化,S/p值≥0.4,如圖1所示。平均S/P值在第35天比第0天有所增加(P<0.05)。平均S/P值在第63天與感染后35天相比沒有顯示出顯著的降低(P>0.05)。

每4個月對繁殖群(n=80頭)、保育豬(n=20頭)和育肥豬(n=20-30頭)進行一次血清學檢查。在繁殖群中,包括所有胎次的母豬。
在育肥豬中,進行血清學評估時考慮了生產流程,對完全獨立場和未完全獨立場分別進行了一個單獨的血清學分析。
母豬群的血清學評估,如圖2所示。統計分析ELISA陽性率。血清學檢測陽性率降低(P<0.05)。在母豬馴化計劃實施后,觀察到明顯的血清學穩(wěn)定,顯示大約20%的PRRSV陽性豬只血清陽性率下降。
如圖3所示,在母豬馴化計劃開始時,保育豬中血清陽性率高。計劃開始后,豬只血清陽性率明顯下降。

在未完全獨立的育肥豬中觀察到持續(xù)的血清轉化,如圖4所示(P>0.05)。相反,通過ELISA,完全獨立的育肥場中PRRSV陽性豬只出現血清陽性率降低(P<0.05)(圖4)。
巴蒂斯塔等人描述了接種后第42天S/P比率的下降,并得出結論,大多數后備母豬不再有病毒血癥,可以轉移到妊娠區(qū)。在本研究中,平均S/P值在接種后63天沒有下降。在將后備母豬轉入母豬群后,才隨后觀察到抗體水平下降。
同樣,測序信息對于確認是否為豬場特有的毒株至關重要。根據母豬群的血清學評估,可以推斷后備母豬管理方案防止了PRRSV在母豬群中的傳播和再循環(huán),因為該群體的S/P比值隨著時間的推移顯著下降。
圖1:母豬馴化血清學箱線圖

圖2:母豬群抗體陽性頻率
-1:后備母豬馴化開始前;0:后備母豬馴化開始;1-9:每隔4個月進行一次馴化

圖3:保育豬抗體陽性頻率
-1:后備母豬馴化開始前;0:后備母豬馴化開始;1-9:每隔4個月進行一次馴化

圖4:完全獨立場育肥場和未完全獨立場育肥場抗體陽性頻率
-1:后備母豬馴化開始前;0:后備母豬馴化開始;1-9:每隔4個月進行一次馴化

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