題目：豬繁殖與呼吸綜合征病毒污染的運(yùn)輸車輛衛(wèi)生規(guī)程評(píng)價(jià)

摘要：

本研究的目的是開發(fā)和測(cè)試一種PRRSV陽性商業(yè)運(yùn)輸車輛冷水清洗和熏蒸消毒的快速(＜2小時(shí))衛(wèi)生規(guī)程。使用斷奶仔豬拖車比例模型，研究分為兩個(gè)階段。試驗(yàn)用PRRSV MN 30-100(5×105TCID50)污染模型拖車，第一階段通過PCR對(duì)處理后0、60和90分鐘的拖車內(nèi)部棉拭子進(jìn)行PRRSV RNA檢測(cè)。第二階段包括監(jiān)測(cè)飼養(yǎng)2小時(shí)陰性哨兵豬PRRSV狀態(tài)的變化評(píng)估處理后90分鐘拖車的傳染性。處理1：僅清洗；處理2：清洗加甲醛熏蒸；處理3：戊二醛-季銨鹽洗滌+熏蒸；處理4：洗滌+過夜烘干。處理1和處理2后的60min和90min，所有拖車(20個(gè)重復(fù))均檢測(cè)到PRRSV RNA。說明這些拖車具有傳染性PRRSV。處理后90min，經(jīng)戊二醛季銨鹽處理的所有拖車PCR陰性，對(duì)哨兵豬無傳染性，豬生物測(cè)定陰性。在烘干8小時(shí)的拖車上也觀察到了類似的結(jié)果。研究表明，消毒劑對(duì)PRRSV有不同程度的效果，PRRSV陽性模型拖車在不過夜烘干的情況下可以有效地進(jìn)行消毒。

模型拖車描述：

整個(gè)研究以斷奶仔豬拖車為評(píng)價(jià)單位。為了進(jìn)行多次重復(fù)實(shí)驗(yàn)，明尼蘇達(dá)大學(xué)建造了4輛斷奶仔豬拖車模型。這些模型是按全尺寸斷奶仔豬拖車1:150的比例建造的。滿載的全尺寸斷奶仔豬拖車(300頭5公斤豬只)與模型拖車(2頭5公斤豬只，每頭0.07平方米)豬只密度相等。全尺寸拖車的材料與模型拖車的材料相同。全尺寸拖車和模型拖車尺寸見表1。

表1:研究中使用的拖車比例模型和全尺寸拖車尺寸和參數(shù)

注釋：Parameters：參數(shù)

Scale model：比例模型

Full-size trailer：全尺寸拖車

Materials：材料

Aluminum：鋁

Structure：結(jié)構(gòu)

Single deck：單甲板

Trailer inventory：拖車容量

Animal density：動(dòng)物密度

Width of trailer：拖車寬度

Length of trailer：拖車長度

Height of trailer：拖車高度

階段1：

采集處理前(立即洗后)和處理后60分鐘和90分鐘拖車內(nèi)部棉拭子檢測(cè)情況見表2。在處理前共采集80個(gè)拭子（每個(gè)處理組20個(gè)樣）檢測(cè)PRRSV RNA。80個(gè)拭子中有79個(gè)拭子檢測(cè)到PRRSV RNA，處理3的3號(hào)拭子為陰性。處理1(僅清洗)和處理2(甲醛)在處理后60分鐘和90分鐘采集的20個(gè)拭子中100%檢測(cè)到PRRSV RNA。相比之下，在處理3(戊二醛-季銨鹽)處理后60分鐘采集的19個(gè)拭子中有2個(gè)拭子檢測(cè)到PRRSV RNA，處理后90分鐘采集的19個(gè)拭子中沒有檢測(cè)到PRRSV RNA。處理4（烘干8小時(shí)）采集的20個(gè)拭子中沒有檢測(cè)到PRRSV RNA。在兩次重復(fù)期間從拖車中采集的拭子重新清洗和擦干后均為PCR陰性。

數(shù)據(jù)分析-處理1和處理2收集的PCR陽性棉拭子數(shù)量與從處理3和處理4收集的陽性棉拭子數(shù)量存在顯著差異(P＜0.001)。

階段2：在接種后第3天和第7天(處理1)，接觸污染的拖車2小時(shí)后4頭豬只中有2頭感染PRRSV(表2)。在接觸甲醛處理過的拖車(處理2)后的2天，4頭豬只中有2頭感染PRRSV。相比之下，在接觸戊二醛-季銨鹽處理過的拖車(處理3和處理4)后，4頭豬只仍保持PRRSV陰性。

在豬只生物測(cè)定中，從處理1（僅清洗）和處理2（清洗加甲醛熏蒸）拖車上收集的木屑上清液接種豬只，接種后第3天和第7天，2頭豬只PCR檢測(cè)呈陽性。處理3和處理4拖車上收集的木屑上清液接種豬只，兩天后PCR檢測(cè)均為陰性。

不良副作用(皮膚刺激、膿腫形成、腫脹)未在生物測(cè)定注射部位檢測(cè)到，豬也未出現(xiàn)發(fā)熱或食欲減退。

表2：階段1和階段2的診斷數(shù)據(jù)

注釋：Area tested：區(qū)域測(cè)試

Trailer interior pretreatment：拖車內(nèi)部預(yù)處理

Trailer interior 60 min posttreatment：拖車內(nèi)部處理后60分鐘

Trailer interior 90 min posttreatment：拖車內(nèi)部處理后90分鐘

Trailer interior allowed to dry (8 h)：拖車內(nèi)部烘干(8小時(shí))

Number of PRRSV (+) pigs postexposure：感染PRRSV豬的數(shù)量(+)

Trt 1 — Treatment 1, washing only; Trt 2 — Treatment 2, washing plus formaldehyde; Trt 3 — Treatment 3,washing plus glutaraldehyde: quaternary ammonium chloride; Trt 4 — Treatment 4, washing plus overnight drying; Neg Ctrl — Sham-inoculated protocol control; NT — Not tested; PRRSV — Porcine reproductive and respiratory syndrome virus：Trt 1 -處理1，僅用于洗滌；Trt 2 -處理2，洗滌加甲醛；處理3、洗滌加戊二醛:季銨銨鹽；Trt 4 -處理4，清洗加一夜干燥；陰性控制-未接種；NT -未測(cè)試；PRRSV -豬繁殖與呼吸綜合征病毒

a Number of polymerase chain reaction (PCR)-positive swabs per number of replicates conducted：PCR陽性拭子數(shù)

b Number of replicates that demonstrated PRRSV infection of na?ve sentinel pigs housed in treated trailers for 2 h per number of replicates conducted：哨兵豬在處理過的拖車中飼養(yǎng)2小時(shí)，感染PRRSV豬只的數(shù)量