豬場病料采集有多種類型，包括鼻拭子，口腔拭子，肛拭子，血液樣及各類組織樣，當(dāng)前非瘟熒光PCR檢測使用較多的是鼻拭子、口腔拭子及環(huán)境樣拭子，豬場常規(guī)監(jiān)測更多的是應(yīng)用ELISA檢測血液中抗體的變化，如果想做抗原檢測會取內(nèi)臟組織樣做PCR檢測或分離病毒細(xì)菌。采集不同類型的樣品有著不同的方法及注意事項。

一、采樣前物資準(zhǔn)備

1. 一次性注射器（5mL ），10 毫升抗凝管，酒精棉球若干（采集血樣）

2. 2mL 離心管，棉簽（2 支/頭），500mL 生理鹽水（采集唾液）

3. 10mL 離心管，淋巴取樣器（1 支/頭），500mL 生理鹽水，酒精棉球若干（采集淋巴）

4. 解剖刀柄（1 把），解剖刀片（1 包）（采集組織樣品）

以上物資根據(jù)采樣需要進(jìn)行選擇。

5. 一次性手套若干雙，乳膠手套若干雙，防護(hù)服若干套、水鞋（1 套/人）， 保定繩（1 條/頭），記號筆 1 支

6. 帶冰袋采樣泡沫箱/ 車載冰箱（1 個），3% 燒堿消毒桶（1 個），1 ：200 衛(wèi)可消毒桶（1 個），高于 70 度水溫消毒桶（1 個），75% 酒精（500mL ），生石灰若干

二、常見病料的采集

1、常見病料的采集和保存注意事項

1.1采集病料要保證及時新鮮，選擇臨床癥狀典型的發(fā)病豬只，死前采用前腔靜脈放血采樣，如果是病死后豬只解剖采樣最好死亡時間不超過6h。

1.2組織的選?。翰杉∽兘M織，每份組織單獨(dú)用自封袋裝，現(xiàn)場一般采集心、肝、脾、肺、腎、扁桃體、淋巴結(jié)等，活體剖檢。注意：操作人戴好一次性PE手套（保護(hù)自己，避免污染樣品），佩戴口罩。組織采樣盡量無菌操作（燒烙）。

1.3腸道內(nèi)容物的采集，腸道選擇特征明顯的部分，將帶有內(nèi)容物的腸管兩端用棉線結(jié)扎，從兩端剪斷；或用棉拭子插到直腸粘膜表面采集糞便；注意不要采現(xiàn)場抗生素治療過的豬只。

1.4全血：凝固樣品3-5毫升，不能冷凍保存，應(yīng)該在2-8℃冷藏，保存時間以不超過3天為宜。全血樣品時間過長，將會引起紅細(xì)胞破裂，影響血清的提取，影響抗體效價。所以采集的病料應(yīng)加足夠的冰塊放入保溫箱中盡快安排送檢。

1.5 血清：血清體積應(yīng)大于1毫升，無嚴(yán)重溶血，澄明透亮，無膠凍樣物質(zhì)（限位欄飼喂的豬只，最好是空腹采血），采血后輕拿輕放，就地放置，待血液凝固方可移動。注意血清樣品不合格，可能導(dǎo)致檢測結(jié)果出現(xiàn)假陽性或者假陰性，使用1.5ml或者2ml的離心管裝血清，不得使用10ml離心管、采血管等耗材裝血清；分離好的血清使用油性記號筆標(biāo)記樣品編號，樣品采集后應(yīng)及時送檢，血清樣品在2～8℃保存不可超過2天，或在-20℃保存不超過30天，避免反復(fù)凍融。

1.6 糞便：需采集剛排出的新鮮糞便，樣品用5 ml或10 ml離心管或干凈的自封袋裝，體積應(yīng)大于3 ml，糞便不能裝得過滿。

1.7環(huán)境試子樣的采集：

人員：用蘸有生理鹽水的長棉簽對人員及攜帶物品進(jìn)行多點(diǎn)重復(fù)采樣，包括頭皮、指甲縫、鼻孔、鞋底、手機(jī)及物品外包裝等。

車輛：用蘸有生理鹽水的棉簽對車體進(jìn)行多點(diǎn)采樣，包括駕駛室（地墊、方向盤）、車輛欄桿、輪胎、車廂，每個點(diǎn)采樣面積應(yīng)不低于50cm2

2、各種疾病臟器采集應(yīng)遵循采集臟器含毒量高的原則。

2.1疑似豬瘟(HC)：主要采集扁桃體、肺門淋巴結(jié)、脾臟、腎臟和全血。

2.2疑似豬繁殖與呼吸障礙綜合癥(PRRS)：主要采集肺組織、血清、扁桃體、脾淋巴結(jié)、糞便，流產(chǎn)胎兒的脾肺，血清和胸水也是適宜的檢驗(yàn)材料。

2.3疑似豬偽狂犬病(PRV)：主要采集病豬腦組織和扁桃體；另外，鼻咽分泌物也可用于病毒分離。

2.4疑似豬口蹄疫(FMD)：采集未破裂或剛破裂的水皰皮（液），對新發(fā)病死亡的動物可采取扁桃體、淋巴結(jié)組織等。

2.5疑似豬傳染性胃腸炎（TGE）：主要采集十二指腸、空腸及回腸的黏膜，在鼻腔、氣管、肺的黏膜及扁桃體、糞便中也可分離到病毒。

2.6疑似豬流行性腹瀉（PED）：主要采集臨床上發(fā)病12h沒有治療過的仔豬空腸及回腸段，至少采5頭。兩端以無菌棉線結(jié)扎后放到冰箱速凍24小時，然后以泡沫箱加冰塊送實(shí)驗(yàn)室檢查。每窩拉稀仔豬，用一根直腸棉拭子采3頭即可。每個棉拭子獨(dú)立包裝，要求一窩一個包裝。

三、檢測和監(jiān)測申請程序

中心實(shí)驗(yàn)室主要開展抗原檢測（PED病原、藍(lán)耳病原、非洲豬瘟病原）、抗體監(jiān)測（豬瘟、藍(lán)耳、偽狂gE、偽狂gB、口蹄疫O型等抗體）及藥敏實(shí)驗(yàn)。

1、為方便實(shí)驗(yàn)室人員及時掌握檢測需求、提升檢測效率并及時反饋檢測結(jié)果，各養(yǎng)殖公司送檢病料及血清前需及時在釘釘上提交申請報告，走審批流程，第一審批人為各養(yǎng)殖公司總經(jīng)理，第二審批人為獸醫(yī)總監(jiān)，第三審批人為事業(yè)部總經(jīng)理，審批完成后，抄送轉(zhuǎn)發(fā)獸醫(yī)部中心化驗(yàn)室，化驗(yàn)室見審批報告方可安排試驗(yàn)。送檢前請如實(shí)填寫實(shí)驗(yàn)室送檢申請表。

2、檢測注意事項

2.1實(shí)驗(yàn)室送檢申請表需認(rèn)真填寫，公司每個豬場，編號從公司名簡稱+2022-01開始，不得重復(fù)編號，便于實(shí)驗(yàn)室核對樣品和及時進(jìn)行檢測。比如XX農(nóng)牧一場送樣，編號就從NM01-2022-01開始。

2.2樣品需添加適當(dāng)數(shù)量的冰袋，用泡沫箱裝，保證運(yùn)送途中到達(dá)實(shí)驗(yàn)室前冰袋沒有完全融化；

2.3送檢樣品不合格，血清樣品編號不清，不予檢測。

2.4為便于實(shí)驗(yàn)室集中檢測，各檢測單位送樣盡量安排在周一至周五上班時間。

2.5特殊情況下，緊急樣品，當(dāng)天收貨，當(dāng)天安排檢測。但須電話提前溝通。