凈化藍(lán)耳,是不少養(yǎng)豬人的終極夢想,而藍(lán)耳病也被農(nóng)業(yè)農(nóng)村部列為種豬場必須凈化的疾病。隨著國內(nèi)豬場生物安全防控的提升,以及藍(lán)耳病毒的自身特性為實(shí)施凈化藍(lán)耳提供了可能。
1、封群原理
封群期間“鼓勵(lì)”PRRS病毒感染,消除易感動(dòng)物后讓病毒自行死亡。PRRS病毒感染會(huì)在豬群中逐漸消失。盡管種豬會(huì)較長時(shí)間帶毒和在一定時(shí)期內(nèi)散毒,但是最終PRRS病毒會(huì)從豬體內(nèi)被清除。利用這些特性實(shí)施PRRSV清除是經(jīng)過性,不用采取清群即可清除PRRSV。特別適合目前4周批生產(chǎn)的種豬場。
2、豬場藍(lán)耳凈化的優(yōu)勢
事先要對整個(gè)配種、后備選留進(jìn)行良好規(guī)劃,在封群期間可適當(dāng)放寬淘汰母豬的條件,在整個(gè)封群過程中對生產(chǎn)幾乎沒有不良影響,總產(chǎn)活仔數(shù)等生產(chǎn)指標(biāo)會(huì)有一定程度的提高。無需通過清群的辦法就可以預(yù)防母豬藍(lán)耳?。≒RRS)的感染,分娩率、斷奶頭數(shù)、斷奶均重、保育期死亡率等指標(biāo)也會(huì)有改善。封群凈化適用于兩點(diǎn)式生產(chǎn)的母豬場,不適用于母豬、保育、育肥在一體的單點(diǎn)式豬場。
3 、實(shí)驗(yàn)室檢測手段
酶聯(lián)免疫吸附測定法(ELISA)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)結(jié)合,ELISA主要用于抗體檢測,PCR方法主要用于病毒檢驗(yàn),作為確定陰性的切實(shí)方法。計(jì)劃使用“哨兵”豬的檢測確認(rèn)陰性。
4 、具體方法與步驟
1)在進(jìn)行封場操作前,須獲得生產(chǎn)數(shù)據(jù),包括封場前一年的各批次斷奶頭數(shù)、批次配種數(shù)、分娩率、窩產(chǎn)活仔數(shù)、保育期死亡率,以作為與PCR檢測結(jié)果進(jìn)行相關(guān)分析,同時(shí)作為封場計(jì)劃的依據(jù);
2)做好封場計(jì)劃,包括確定封場日期、時(shí)間、配種計(jì)劃、后備豬的場內(nèi)培育計(jì)劃、豬群大小的維持。
3)做好180~260天為周期的配種計(jì)劃,在該計(jì)劃指引下,計(jì)算好后備種豬的需求數(shù)量,做好場內(nèi)培育種豬的規(guī)劃,在計(jì)劃開始前1個(gè)月將所需的后備種豬在封群前一次性引入到豬場內(nèi)進(jìn)行培育,確保在整個(gè)封群過程中不會(huì)出現(xiàn)后備豬斷檔。
4)感染用血清的制備與使用∶將樣豬(進(jìn)群前是陰性的后備豬)用雙節(jié)管采血(采血量需要確認(rèn));分離血清,一半的血清進(jìn)行PCR送檢、另外一半保存于豬場冰箱內(nèi);通過PCR確定PRRS感染陽性后(必須同時(shí)確認(rèn)豬瘟、偽狂犬等陰性),留樣部分用于接種陰性后備豬(接種劑量依照檢測結(jié)果而定)。
5)接種后的第7~10天,30頭接種的后備豬的血液,使用血清分離管收集,每頭豬6毫升;2000轉(zhuǎn)離心30分鐘,在冰箱中等待凝血;將所有血清倒入干凈、滅菌瓶中,約100毫升。將血清按2毫升每管,分裝于2毫升的低溫儲(chǔ)藏管中;送入液氮罐中保存,將其中1管從液氮罐中取出后送檢。檢測項(xiàng)目有,將經(jīng)過1次凍融的血清進(jìn)行PCR,檢測PRRS病毒陽性;對PRRS病毒的毒株進(jìn)行確認(rèn);進(jìn)行PRRS的定量PCR,按照其半數(shù)細(xì)胞感染量計(jì)算。每2個(gè)月抽取1管,重復(fù)上述3種檢測。
6)依照測量病毒濃度,計(jì)算出稀釋用生理鹽水量,使之終濃度為每毫升100倍組織半數(shù)感染量;將管取出后在手掌心解凍1~2分鐘;倒入計(jì)算好量的生理鹽水中,每200毫升加入400萬單位青霉素;每半個(gè)小時(shí)注射1次,每頭豬2毫升,其病毒劑量為200倍的組織半數(shù)感染量。
7)整個(gè)封群持續(xù)期6~9個(gè)月,期間除預(yù)先選定的后備豬外,不再把任何后備豬引入豬群;同時(shí)做好封群開始后每批次的數(shù)據(jù)收集與獲得,包括∶每批次斷奶頭數(shù)、批次配種數(shù)、分娩率、窩產(chǎn)活仔數(shù)、保育期死亡率。
8)此后對每批斷奶豬進(jìn)行采血,每次采血20頭、每4頭混合為1 個(gè)檢驗(yàn)樣品,用混合的血清進(jìn)行PCR檢測,確認(rèn)PRRS陰性。在連續(xù)2次采血經(jīng)PCR檢測均為陰性,可以確認(rèn)豬群呈現(xiàn)“穩(wěn)定”狀態(tài),豬群呈現(xiàn)穩(wěn)定狀態(tài)并達(dá)到封場6個(gè)月時(shí)間者,就可以恢復(fù)正常生產(chǎn)。
9)豬群中放入“哨兵”豬,通過對“哨兵”豬的狀況,確認(rèn)封群的效果,即PRRS是否真的被清除。恢復(fù)正常生產(chǎn)后應(yīng)堅(jiān)持引種PRRS陰性種豬。
5 配套生物安全措施
1)保證提供的精液全部為陰性。
2)運(yùn)輸工具應(yīng)專用,陰性場和陽性場的車輛決不能混用;
3)車輛用紅外線烘干消毒。
4)所有進(jìn)場器械均為雙層封袋,進(jìn)場前去掉首層封袋,使用前再去除內(nèi)層封袋。
5)禁止外來人員進(jìn)入豬場。
6)所有疫苗、藥品均送到指定地點(diǎn),杜絕多點(diǎn)存放。
附件:感染藍(lán)耳后的時(shí)間軸(McCaw.2006)
以下所列的時(shí)間軸是單個(gè)豬清除藍(lán)耳病毒的多個(gè)事件,要把藍(lán)耳病毒從體內(nèi)清除出去,需要花很多時(shí)間建立完全免疫力
PRRSV感染后的時(shí)間
10—30d 病毒血癥(從血液可以分離到病毒),強(qiáng)烈抗體反應(yīng)
20—30d 最早檢測到中和抗體
60d+ 血液中的中和抗體達(dá)到頂峰
100—150d 扁桃體/淋巴結(jié)變成藍(lán)耳病毒陰性(在保育舍發(fā)生感染),許多豬變成藍(lán)耳抗體陰性(<0.4S/P ratio),但血清中和抗體還是陽性
150d++ 扁桃體/淋巴結(jié)變成藍(lán)耳病毒陰性
200d 單個(gè)豬場封群所需時(shí)間
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