飼料作為動(dòng)物性食品的重要物質(zhì)保障，飼料的質(zhì)量安全直接影響到動(dòng)物性食品的安全，進(jìn)而影響到人類的身體健康。做好飼料的常規(guī)成分分析檢測(cè)，是飼料工業(yè)生產(chǎn)中的重要環(huán)節(jié)，也是保證飼料原料和各種產(chǎn)品質(zhì)量的重要手段[1)。飼料產(chǎn)品檢測(cè)中常規(guī)營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)主要包括粗蛋白、粗灰分、水分、鈣、總磷、粗脂肪、粗纖維、水溶性氯化物等8項(xiàng)，每項(xiàng)指標(biāo)依據(jù)相應(yīng)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的檢驗(yàn)方法進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)難度雖然不大，但檢測(cè)過(guò)程中的一些操作細(xì)節(jié)會(huì)造成較大的結(jié)果差異。從近幾年飼料行業(yè)組織的相關(guān)實(shí)驗(yàn)室間能力比對(duì)來(lái)看，有10%~20%的結(jié)果不滿意，個(gè)別實(shí)驗(yàn)室的水分檢測(cè)都存在問(wèn)題。本文將各種成分測(cè)定時(shí)的關(guān)鍵點(diǎn)以及實(shí)驗(yàn)過(guò)程中可能遇到的問(wèn)題進(jìn)行詳細(xì)的分析總結(jié)，以期為飼料質(zhì)量安全的檢測(cè)提供參考。

1、飼料中粗蛋白的測(cè)定

飼料中粗蛋白的測(cè)定一般采用GB/T6432-2018《飼料中粗蛋白的測(cè)定凱氏定氮法》[2]。

(1)樣品的粉碎粒度：要求粉碎后全部通過(guò)0.42 mm標(biāo)準(zhǔn)篩。樣品粒度會(huì)對(duì)分析時(shí)間和測(cè)量效果產(chǎn)生影響，需要根據(jù)不同的樣品物理性質(zhì)及蛋白質(zhì)含量對(duì)樣品進(jìn)行粉碎過(guò)篩[3)。

(2)合適的稱樣量：根據(jù)待測(cè)樣品中粗蛋白含量的高低，預(yù)估鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的使用量，保證滴定體積在10mL以上，一般魚(yú)粉、肉粉、羽毛粉、玉米蛋白粉類飼料原料稱樣量為0.25 g左右，豆粕、棉粕、濃縮飼料稱樣量為0.40 g 左右，配合飼料稱樣量為 0.50g左右，玉米、次粉類樣品稱樣量為0.80g左右，一般樣品加入6.4g混合催化劑和12 mL 硫酸即可，稱樣量大的樣品在消解時(shí)可適當(dāng)補(bǔ)加3~5 mL 硫酸。研究表明，消化過(guò)程中催化劑的性質(zhì)和用量對(duì)終結(jié)果有顯影響[4]。

(3)消解溫度和時(shí)間一般控制在420℃、4h左右。當(dāng)消解液為澄清的藍(lán)綠色時(shí)，代表消解完全:如消解液為渾濁狀，則消解不完全，可能的原因有消解溫度偏低、消解時(shí)間不夠等，需提高消解溫度或延長(zhǎng)消解時(shí)間。

(4)消解過(guò)程控制:為防止爆沸導(dǎo)致消化液沾壁、消解不徹底，消解溫度應(yīng)逐漸升高:若樣品水分含量較高，直接消解會(huì)發(fā)生暴沸，可以選擇程序升溫，180C維持30min270C維持30min420°C維持2~3 h。

(5)高脂肪或高糖類樣品在消解時(shí)應(yīng)注意防止產(chǎn)生大量泡沫，該類樣品稱完樣后可在消解液中浸泡2h后再進(jìn)行消解。

(6)蒸餾裝置要保持良好的氣密性，防止漏氣，使用前用硫酸銨(99.9%)進(jìn)行檢查 要求硫酸銨含氮量在21.19%+0.20%。

(7)消化爐的消解孔不能有空位置，可以用空白消化管加硫酸補(bǔ)位。

(8)定期檢查各消解孔溫度的均勻性，溫度偏低的孔會(huì)造成消解不完全，結(jié)果偏低?？捎酶骺紫鉁y(cè)定同一飼料，結(jié)果與平均結(jié)果的精密度超出國(guó)標(biāo)要求范圍的孔標(biāo)記不用。

(9)鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度一般控制在0.1 mol/L±5%范圍內(nèi)(具體請(qǐng)參照GB/T601-2016化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備》[3]);在滴定時(shí)，鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液濃度過(guò)低會(huì)消耗過(guò)多的滴定液，造成試劑浪費(fèi)，濃度過(guò)高則消耗的滴定液過(guò)少，導(dǎo)致較大的系統(tǒng)誤差。配制鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)。需要標(biāo)定后使用。

(10)混合指示液不可存放時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，否則乙醇揮發(fā)會(huì)導(dǎo)致指示終點(diǎn)顏魚(yú)發(fā)生變化，儲(chǔ)存時(shí)應(yīng)注意室溫避光、密封保存，有效期為 3 個(gè)月。經(jīng)驗(yàn)表明，夏季 2 周、冬季 4周內(nèi)使用效果最佳。

(11)硼酸吸收液盡量現(xiàn)用現(xiàn)配，儲(chǔ)存時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。全自動(dòng)程序使用時(shí)室溫可保存1個(gè)月，否則硼酸氨分解揮發(fā)，導(dǎo)致結(jié)果偏低。

(12)要保證蒸餾過(guò)程中的堿性環(huán)境，加堿要過(guò)量，一般是加入硫酸量的4倍。如在恭餾過(guò)程中加堿后消解液的顏色沒(méi)有變黑，要立即停止蒸餾，并補(bǔ)加氫氧化鈉溶液至消解液變黑。

(13)蒸餾過(guò)程中長(zhǎng)時(shí)間使用高濃度氫氧化鈉溶液，管路內(nèi)部會(huì)形成固體結(jié)晶，造成管路堵塞從而減少加堿量。甚至無(wú)法加堿。因此應(yīng)定期將氫氧化鈉溶液換成溫蒸餾水對(duì)管路進(jìn)行清洗。

(14)使用蔗糖代替樣品進(jìn)行空白測(cè)定，空白試驗(yàn)應(yīng)符合標(biāo)準(zhǔn)要求，如果滴定體積過(guò)大，應(yīng)檢查試劑質(zhì)量;

(15)通過(guò)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)或質(zhì)控樣品來(lái)驗(yàn)證結(jié)果的準(zhǔn)確性。

除了上述的凱氏定氮法外，杜馬斯燃燒定氮法逐漸被推廣使用。杜馬斯燃燒定氨法是一種快速、低成本、自動(dòng)化高的定氮方法[36，能將樣品所含的有機(jī)氮和無(wú)機(jī)氮全部轉(zhuǎn)化成氮的氧化物后進(jìn)行測(cè)定門(mén)，每個(gè)樣品僅需 4~6 min8]。但該法不能直接檢測(cè)液體樣品，且對(duì)樣品的粒度和均勻性都有嚴(yán)格要求，對(duì)于復(fù)雜樣品的分析效果欠佳具有一定的局限性6。有研究表明，杜馬斯定氮法測(cè)定植物性飼料原料中粗蛋白的結(jié)果比凱氏定氮法結(jié)果略高[3,9]。