5、飼料中鈣的測定

飼料中鈣的測定一般采用GB/T6436-2018《飼料中鈣的測定》[20]。

國標中有兩種測定方法:高錳酸鉀法和乙二胺四乙酸二鈉絡合滴定法，這兩個方法均為滴定法。若是植物性飼料原料或其他鈣含量較低的樣品，可選用GB/T13885-2017《飼料中鈣、銅、鐵、鎂、錳、鉀、鈉和鋅含量的測定原子吸收光譜法》1進行檢測，該方法檢出限為50mg/kg。測定時要根據(jù)樣品的類別、性質(zhì)選擇合適的前處理方式，濕法消解加入高氯酸后，嚴禁蒸干，通常也可和總磷測定共用一份處理液。

5.1高錳酸鉀法注意事項

(1)甲基紅指示劑應定期配制，于棕色瓶中可儲存2個月左右;

(2)生成草酸鈣沉淀時應注意:將試樣分解液于電爐上小心煮沸，向燒杯中慢慢滴加熱的草酸銨溶液(42 g/L)并不斷攪拌，如果溶液變?yōu)槌壬瑧a加鹽酸溶液(1:3,體積比)使其變?yōu)榧t色，再煮沸數(shù)分鐘，防止沉淀形成細小顆粒，草酸銨溶液應提前加熱:

(3)室溫下放置過夜(12 h)或沸水浴加熱2 h使沉淀陳化;

(4)洗滌草酸鈣沉淀時，應使用無灰的中速定量濾紙，必須沿濾紙邊緣向下洗，使沉淀集中于濾紙中心，以免損失。每次洗滌不得超過漏斗體積的2/3[22]，

(5)高錳酸鉀標準溶液滴定時，最初 1~2 滴滴入變紅.紅色褪去速度較慢，不斷攪拌使溶液均勻，隨后可勻速滴定，邊滴邊攪拌，當?shù)稳撕蠹t色面積越來越大時，即快到滴定終點，最后半滴滴人，搖勻后溶液呈粉紅色，30s不褪色，即到終點。配制高錳酸鉀標準溶液時，需要標定后使用。

5.2 乙二胺四乙酸二鈉絡合滴定法注意事項

(1)要注意加人掩蔽劑的順序，每加一種試劑，均需充分混勻，若是順序出現(xiàn)差錯或未搖勻，建議重做:

(2)淀粉溶液應現(xiàn)用現(xiàn)配;

(3)三乙醇胺本身黏度較大，配成50%(V/V)的溶液便于使用:乙二胺由于揮發(fā)性較強，也可配成50%(V/V的溶液使用[21;

(4)加入氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)pH值到強堿性后應立即進行滴定，防止鈣沉淀，一般此時的pH 值應大于 12:

(5)應在黑色背景下進行滴定，因鈣黃綠素指示劑不穩(wěn)定，一般用固體，指示劑加人量過多，會影響滴定終點顏色的判斷。

6、飼料中總磷的測定

飼料中總磷的測定一般采用GB/T6437-2018《飼料中總磷的測定 分光光度法》[23]。

(1)注意標準適用范圍，本標準適用于飼料原料及飼料產(chǎn)品，飼料添加劑要按照其產(chǎn)品標準規(guī)定的方法進行相關指標的檢測，比如，飼料添加劑磷酸氫鈣中總磷含量測定應按照其產(chǎn)品標準GB22549-2017《飼料添加劑磷酸氫鈣》[24]的規(guī)定執(zhí)行;

(2)磷標準貯備液:制備好的磷標準貯備液(50ug/mL)需置于聚乙烯瓶中4℃可儲存1個月:

(3)顯色劑:避光保存，放置時間不宜過久，使用前應檢查是否有絮狀物和沉淀生成，若有則不能繼續(xù)使用;

(4)干灰化:國標規(guī)定“炭化后，在550℃灼燒3 h(或測粗灰分繼續(xù)進行)”，對于稱樣量較大的情況，應適當延長灼燒時間，保證徹底灰化，同時需注意檢查坩堝是否炸裂;

(5)濕法消解時注意安全，加人高氯酸后應防止蒸干;(6)鹽酸溶解法適用于載體內(nèi)不含有機物的微量元素預混合飼料;

(7)分光光度計在使用時，吸光度一般在 0.2~0.8之間時誤差較小，低含量樣品應加大稱樣量或增大移取體積。高含量樣品應適當進行稀釋，使樣品的吸光度在標準曲線的范圍內(nèi);

(8)不同類型樣品應選擇相應的前處理方式，每次測定時都應重新繪制標準曲線。有人檢測總磷時不做標準曲線，一直沿用之前的回歸方程進行計算結(jié)果。

7、飼料中粗脂肪的測定

飼料中粗脂肪的測定一般采用GB/T6433-2006《飼料中粗脂肪的測定》[25]。

(1)注意國標的適用范圍，先分B類再分A類，油籽和油籽殘渣不適用于本標準。膨化膨脹類飼料原料及膨化類飼料產(chǎn)品，使用索氏直接抽提法測定粗脂肪結(jié)果嚴重偏低應采用酸水解法[26。乳粉類產(chǎn)品使用索氏直接抽提法測定粗脂肪結(jié)果嚴重偏低，建議采用食品方法進行檢測[27].

(2)石油醚要使用沸點范圍40~60℃的，用脫脂棉覆蓋樣品易有顆粒流出，建議用濾紙包樣品。濾紙包的高度要低于提取器虹吸管的高度:

(3)注意回流的速度和時間，調(diào)節(jié)加熱裝置，使每小時至少回流10次一般樣品要求回流60次以上若回流次數(shù)達不到，可適當延長回流時間或提高加熱溫度;

(4)抽提好的樣品放人烘箱干燥前，應先在通風櫥內(nèi)晾一會，揮發(fā)除去殘留的石油醚:

(5)如使用自動抽提儀或索氏抽提儀，以儀器的使用方法為參考，用質(zhì)控樣驗證儀器提取效果，并調(diào)節(jié)最佳蒸餾速度;

(6)可用無水乙醚代替石油醚進行抽提樣品:

(7)抽提過程嚴禁明火加熱，保持室內(nèi)良好的通風[28]。最好在通風柜中進行。