01  ASFV在不同溫度下的研究

有許多研究已經(jīng)證明了非洲豬瘟病毒在土壤、飼料、豬肉、糞便等基質(zhì)中的存活情況。此前，有研究發(fā)現(xiàn)，在實驗條件下，感染劑量的非洲豬瘟病毒可能存在于液體環(huán)境中，但非洲豬瘟病毒在真實水體環(huán)境中的存活能力，尚未得到很好的研究。

最近，英國布萊特研究所的研究人員對非洲豬瘟病毒在不同溫度條件下，在河水中的穩(wěn)定性進(jìn)行了評估。研究人員在泰晤士河及其主要支流沿岸不同地點采集水樣，并將ASFV BA71V毒株（基因?型）毒株接種到水樣中，分別在4℃，15℃和21℃下進(jìn)行培養(yǎng)，并在培養(yǎng)第0、7、14、21和42天后，使用空斑測定法計算各樣本中的病毒滴度。

結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在4℃的環(huán)境溫度下培養(yǎng)21天，各組的病毒滴度沒有顯著差異，但隨著培養(yǎng)時間延長和培養(yǎng)溫度的升高，病毒的穩(wěn)定性和感染性都將降低。與蒸餾水對照組相比，環(huán)境溫度升高到15℃和21℃時，天然河水樣本中的病毒滴度，下降更為明顯。平均而言，ASFV BA71V毒株在4℃環(huán)境溫度下，培養(yǎng)42天，仍保持傳染性，但溫度升高至15℃和21℃時，病毒的穩(wěn)定性下降，分別縮短為28天和14天。病毒在15°C和21°C下孵育28天后，滴度會出現(xiàn)4log10的降低，此時病毒被認(rèn)為已失去傳染性。

圖1 泰晤士流域地圖，采樣點位置

圖2 VERO病毒接種試驗

圖3 病毒在4℃、15℃和21℃水樣中隨時間的滴度變化

02   60℃加熱處理2小時，非洲豬瘟病毒依然存活且發(fā)生致弱

發(fā)表于《Viruses》雜志上的一篇文章表明：對格魯吉亞2型ASFV在60℃環(huán)境下加熱2小時后，在肺泡巨噬細(xì)胞上無法培養(yǎng)出病毒，但將加熱后的病毒接種豬只后，病毒竟然復(fù)活了，但復(fù)活后的病毒的毒力變?nèi)趿恕?

原文表示，在嘗試通過熱處理滅活Georgia 2007/1菌株時，研究團(tuán)隊偶然產(chǎn)生了一種名為ASFV-989的減毒株。與Georgia相比，ASFV-989毒株基因組在MGF 505/360的5'端編碼區(qū)缺失了7458個核苷酸，這使得DIVA PCR系統(tǒng)的建立成為可能。在豬肺泡巨噬細(xì)胞中，ASFV-989和Georgia株的復(fù)制動力學(xué)相同。在體內(nèi)，接種了ASFV-989毒株的無特異性病原體（SPF）豬，無論是肌肉注射還是口鼻注射，都表現(xiàn)出短暫的高溫和輕微的生長性能下降。

用ASFV-989株感染動物的病毒血癥比接種格魯吉亞株低100~1000倍，并產(chǎn)生快速的抗體和細(xì)胞介導(dǎo)反應(yīng)。在接種ASFV-989疫苗的豬中，格魯吉亞毒株攻毒2或4周后，沒有記錄任何癥狀，也沒有檢測到攻毒株的病毒血癥。這些結(jié)果表明，ASFV-989毒株是一種有希望的非轉(zhuǎn)基因候選疫苗，可用于肌肉注射或口鼻注射。