裸藻源β-1,3-葡聚糖是被廣泛認(rèn)可的高效免疫調(diào)節(jié)劑，它可以提升動物機體免疫力，在人和動物中都有很好的推廣和應(yīng)用，研究成果也在不斷推陳出新。2022年底在國際知名獸醫(yī)雜志Open Veterinary Journal發(fā)表了一篇其在豬上的研究成果，題目和作者見圖1。題目簡單地說明了β-葡聚糖對非洲豬瘟病毒的影響，從文中材料與方法可知其葡聚糖為線性裸藻源β-1,3-葡聚糖。本篇譯文將挑選幾項重點研究結(jié)果，以饗讀者。

圖1 β-葡聚糖的免疫效果研究發(fā)表文章題目截圖

01目的

在這項研究中，作者以豬肺泡巨噬細(xì)胞（PAM）模型研究裸藻源β-1,3-葡聚糖對PAM活力的作用效果。

02材料與方法

為評估裸藻源β-1,3-葡聚糖對豬肺泡巨噬細(xì)胞的潛在影響， 本研究采用MTT比色法評估裸藻源β-1,3-葡聚糖對免疫細(xì)胞增殖的影響。

收集豬肺泡巨噬細(xì)胞，通過血細(xì)胞計數(shù)器計數(shù)，使用培養(yǎng)基對原代肺泡巨噬細(xì)胞進行稀釋，使細(xì)胞濃度為106個/ml。

將該細(xì)胞懸液用100μl移液器均勻分配到96孔微量滴定板中，并在5%CO2中孵育24小時，培養(yǎng)溫度為37°C。

用0μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖(對照組)、30μg/ml 裸藻源β-1,3-葡聚糖和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理肺泡巨噬細(xì)胞2小時, 然后使用103HAD50/ml的越南非洲豬瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒。

在5%CO2、37°C條件下孵育24、48、72、96和120小時，使用MTT試劑盒測定細(xì)胞增殖結(jié)果，通過實時熒光定量PCR進一步檢測裸藻源β-1,3-葡聚糖對越南分離的田間ASFV毒株的潛在影響。

使用夾心酶聯(lián)免疫吸附測定法檢測裸藻源β-1,3-葡聚糖誘導(dǎo)的干擾素（IFN）-α和白細(xì)胞介素（IL）-6的濃度。

03結(jié)果與討論

3.1裸藻源β-1,3-葡聚糖能促進豬肺泡巨噬細(xì)胞的活力

用30和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理豬肺泡巨噬細(xì)胞2小時，對照組未加入裸藻源β-1,3-葡聚糖處理，然后使用103HAD50/ml的越南非洲豬瘟病毒（ASFV）HN02毒株攻毒，在5%CO2 在37°C條件下孵育24、48、72、96和120小時，用MTT試劑盒測定細(xì)胞增殖，結(jié)果如圖2所示。

圖2 MTT比色法測定β-1,3-葡聚糖對PAM細(xì)胞活力的影響

圖表來源：Open Veterinary Journal,2022

結(jié)果表明，與對照組相比，30或50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖處理組能夠以劑量依賴性方式提高細(xì)胞存活率，并且這些效果一直持續(xù)到120小時。

3.2裸藻源β-1,3-葡聚糖對豬肺泡巨噬細(xì)胞有免疫增強作用

使用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理 PAM 2小時后，暴露于103HAD50/ml ASFV 持續(xù) 12、24小時。

收集上清液，然后對ASFV的DNA p72基因進行實時PCR擴增，檢測裸藻源β-1,3-葡聚糖處理的PAM中病毒DNA的拷貝數(shù)，結(jié)果如圖3所示。

與對照組相比，使用裸藻源β-1,3-葡聚糖處理的PAM感染12小時后的病毒滴度顯著降低。

圖3 裸藻源β-1,3-葡聚糖對PAM抗病毒活性的影響

圖表來源：Open Veterinary Journal,2022

3.3高劑量的裸藻源β-1,3-葡聚糖顯著增強了病毒感染后PAM中IFN-α和IL-6的產(chǎn)生

用30μg/ml和50μg/ml裸藻源β-1,3-葡聚糖預(yù)處理PAM 2小時并設(shè)立對照組，然后暴露于103HAD50/ml ASFV病毒條件下，持續(xù)12小時（A、C）和24小時（B、D）產(chǎn)生的細(xì)胞因子IFN-α和IL-6如圖4。

圖4 裸藻源β-1,3-葡聚糖處理PAM后感染ASFV產(chǎn)生細(xì)胞因子的濃度對比

備注:

A:12小時IFNα濃度（pg/mL）

B:24小時IFNα濃度（pg/mL）

C:12小時IL-6濃度（pg/mL）

D:24小時IL-6濃度（pg/mL）

圖表來源：Open Veterinary Journal,2022

與對照組相比，裸藻源β-1,3-葡聚糖（30μg/ml和50 μg/ml）兩個處理組在12h時IFN-α和IL-6的產(chǎn)生均顯著增加，并持續(xù)到24h。

高劑量的裸藻源β-1,3-葡聚糖顯著增強了感染后PAM中IFN-α和IL-6的產(chǎn)生。

04結(jié)論

本研究結(jié)果揭示了裸藻源β-1,3-葡聚糖對ASFV的影響，其作用機制可能與細(xì)胞免疫反應(yīng)有關(guān)，且對裸藻源β-1,3-葡聚糖存在劑量依賴作用。

此外，研究還表明，裸藻源β-1,3-葡聚糖可以顯著提升宿主免疫力。