2023年12月9日，《自然-通訊》（Nature Communications）雜志在線發(fā)表了中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)院、畜禽生物育種全國(guó)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室韓建永教授課題組的研究成果《穩(wěn)定的豬上胚層干細(xì)胞制備三維肉樣組織》（Generation of three-dimensional meat-like tissue from stable pig epiblast stem cells）。

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)肉的制備是未來食品業(yè)的一項(xiàng)顛覆性技術(shù), 有望作為傳統(tǒng)畜牧業(yè)的有效補(bǔ)充, 從而有利于促進(jìn)環(huán)境可持續(xù)性和農(nóng)業(yè)碳減排，保障公共衛(wèi)生安全和動(dòng)物福利，緩解人畜口糧競(jìng)爭(zhēng)。全球已有超過上百家研究機(jī)構(gòu)或初創(chuàng)公司進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)肉的研發(fā), 但實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)肉的規(guī)模化生產(chǎn)仍面臨諸多挑戰(zhàn), 其中優(yōu)質(zhì)種子細(xì)胞的獲取、無動(dòng)物源成分的培養(yǎng)基和3D可食用支架的研發(fā)、大規(guī)模培養(yǎng)的工程化等是細(xì)胞培養(yǎng)肉產(chǎn)業(yè)化過程中亟需解決的技術(shù)瓶頸。

韓建永教授課題組長(zhǎng)期致力于大家畜早期胚胎發(fā)育及多能干細(xì)胞相關(guān)的研究工作, 針對(duì)上述技術(shù)瓶頸進(jìn)行攻關(guān), 在細(xì)胞培養(yǎng)肉研發(fā)方面取得突破性成果。本研究利用實(shí)驗(yàn)室前期所獲得的豬上胚層干細(xì)胞 (Cell Research, 2021), 建立了豬胚胎多能干細(xì)胞向肌肉無血清定向誘導(dǎo)分化的技術(shù)體系, 并結(jié)合無動(dòng)物源成分的3D支架, 首次實(shí)現(xiàn)了豬胚胎多能干細(xì)胞來源動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)肉的制備, 具備以下創(chuàng)新性：

1. 攻克了干細(xì)胞體外長(zhǎng)期穩(wěn)定傳代問題

胚胎干細(xì)胞具有體外無限擴(kuò)增及分化成各種組織細(xì)胞的能力, 是細(xì)胞培養(yǎng)肉的理想種子細(xì)胞。研究團(tuán)隊(duì)獨(dú)辟蹊徑、突破瓶頸, 創(chuàng)建了豬穩(wěn)定胚胎干細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)體系 (Cell Research, 2021) , 解決了近40年來大家畜胚胎干細(xì)胞建系的國(guó)際難題。本研究進(jìn)一步驗(yàn)證該細(xì)胞系可體外長(zhǎng)期穩(wěn)定傳代并維持細(xì)胞的多能性及基因組的穩(wěn)定（截至發(fā)文已傳超過300代），而細(xì)胞培養(yǎng)肉領(lǐng)域常用的肌肉干細(xì)胞只能傳代20-30代。如果按胚胎干細(xì)胞最低增殖比例1:3進(jìn)行傳代, 一個(gè)起始細(xì)胞在約30代的時(shí)候可獲得330個(gè)細(xì)胞，即可生產(chǎn)出相當(dāng)于一頭成年豬的所有細(xì)胞量（約1014個(gè)細(xì)胞），只需要50代即可生產(chǎn)出相當(dāng)于70億頭生豬的細(xì)胞量，為中國(guó)生豬年出欄量的10倍，而且只需要100-150天。因此具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的豬胚胎干細(xì)胞分離培養(yǎng)技術(shù)體系不僅解決了大家畜干細(xì)胞建系的國(guó)際難題，也有望成為細(xì)胞培養(yǎng)肉產(chǎn)業(yè)領(lǐng)域的重要底盤技術(shù), 為搶占該領(lǐng)域創(chuàng)新和產(chǎn)業(yè)發(fā)展的制高點(diǎn)提供技術(shù)與資源保障。

2. 建立了豬胚胎干細(xì)胞向肌肉細(xì)胞無血清定向誘導(dǎo)分化的技術(shù)體系

本研究建立了豬胚胎干細(xì)胞向肌肉細(xì)胞分階段定向誘導(dǎo)分化的技術(shù)體系, 可實(shí)現(xiàn)全程無血清添加和無轉(zhuǎn)基因的肌原性分化，并研發(fā)出適合豬胚胎干細(xì)胞肌原性分化的無血清培養(yǎng)基。組學(xué)層面進(jìn)一步驗(yàn)證所獲得的肌肉細(xì)胞與體內(nèi)的肌肉細(xì)胞相似，可確保細(xì)胞培養(yǎng)肉的清潔與安全, 有望實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)肉營(yíng)養(yǎng)可控等多種要求。

3. 研發(fā)了無任何動(dòng)物源成分的3D可食用支架

本研究解決了干細(xì)胞分化過程中與可食用3D支架的親和性問題, 研發(fā)了無任何動(dòng)物源成分的3D可食用支架, 實(shí)現(xiàn)了細(xì)胞體外大量擴(kuò)增。本研究還首次成功利用豬胚胎干細(xì)胞分化技術(shù)制備了與正常肉類指標(biāo)相似的細(xì)胞培養(yǎng)肉, 具有明顯的肌肉外觀和紋理，而且富含條件必需氨基酸，不易受食源性致病菌的污染，表明本研究已具備了邁向產(chǎn)業(yè)化的理論與技術(shù)。

總的來說，這項(xiàng)研究不僅有望解決起始細(xì)胞長(zhǎng)期穩(wěn)定擴(kuò)增的問題, 提高胚胎來源的多能干細(xì)胞在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)肉研發(fā)中的利用率, 還能為其它家畜動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)肉的制備提供理論參考, 也有望為未來功能性食品的研發(fā)和“清潔”肉類的供應(yīng)提供新的技術(shù)途徑和科技支撐。目前, 韓建永教授團(tuán)隊(duì)在現(xiàn)有的成果基礎(chǔ)之上, 正致力于突破種子細(xì)胞更大規(guī)模培養(yǎng)以及低成本培養(yǎng)基研發(fā)的技術(shù)難題, 以實(shí)現(xiàn)細(xì)胞培養(yǎng)肉的產(chǎn)業(yè)化。

該研究得到國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃 (2022YFD1302201, 2016YFA0100202)、中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)未來功能食品研發(fā)計(jì)劃 (SJ2021002004)、國(guó)家自然科學(xué)基金 (31970825, 31772601, 31972099, 32172143) 和北京市自然科學(xué)基金 (6192005) 等項(xiàng)目的資助。中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)為該研究工作的第一完成單位，本校朱高翔博士 (已畢業(yè))、高登峰博士 (已畢業(yè)) 和西北農(nóng)林科技大學(xué)李鱗子博士 (在讀) 為本文的共同第一作者，中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物學(xué)院韓建永教授、西北農(nóng)林科技大學(xué)食品學(xué)院馮憲超教授和北京工商大學(xué)食品與健康學(xué)院馬愛進(jìn)教授為本文的共同通訊作者。

原文鏈接：https://doi.org/10.1038/s41467-023-44001-8