非瘟疫苗最新消息：

2019年8月6日，中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所(中國(guó)動(dòng)物衛(wèi)生與流行病學(xué)中心哈爾濱分中心)的《基因缺失的減毒非洲豬瘟病毒及其作為疫苗的應(yīng)用》專利申請(qǐng)公布。發(fā)明人為步志高、?陳偉業(yè)、趙東明、何希君、劉任強(qiáng)和柳金雄，專利申請(qǐng)日期為2019年4月26日。

發(fā)明內(nèi)容概括：

1、針對(duì)非洲豬瘟疫苗缺乏和已知疫苗的有效性不夠理想，尤其國(guó)內(nèi)疫苗的空白，研發(fā)非洲豬瘟基因缺失減毒疫苗的制備方法，并成功獲得了兩株安全、有效的疫苗株。

2、采用基因工程手段，對(duì)中國(guó)流行的非洲豬瘟分離株進(jìn)行毒力基因(CD2V和MGF360-505R)缺失，獲得了兩株缺失毒株( RASFV△360-eGFP和 RASFV△CD2V/360-eGFP-mcherry)，經(jīng)過(guò)免疫和攻毒保護(hù)效力等系統(tǒng)評(píng)價(jià)，將效價(jià)和安全性均表現(xiàn)優(yōu)異。

3、提供一種基因缺失減毒非洲豬瘟病毒，其特征在于，將基因I型的非洲豬瘟病毒進(jìn)行MGF360-505R基因缺失，或進(jìn)行CD2V與MGF360-505R基因聯(lián)合缺失而得到的。更優(yōu)選的是MGF360-505R聯(lián)合缺失是指MGF360和505R兩種基因全部序列缺失，或者CD2V與MGF360-505R聯(lián)合基因缺失是指CD2V、MGF360、505R三種基因序列全部缺失。

4、所述基因I型的非洲豬瘟病毒是中國(guó)流行株P(guān)ig/CN/HLJ/2018，其全長(zhǎng)序列已于 Genbank公開(kāi)( Genbank:MK333180.1)。

5、優(yōu)選的MGF360-505R基因缺失病毒相對(duì)于原始毒株全長(zhǎng)序列缺失了第27942-35500位核苷酸;所述CD2V與MGF360-505R基因聯(lián)合缺失病毒相對(duì)于原始毒株全長(zhǎng)序列缺失了第27942-35500位和第73394-74476位核苷酸。更具體構(gòu)建的MGF360-505R基因缺失病毒，和CD2V與MGF360-505R聯(lián)合缺失的基因缺失病毒，已于2019年4月11日進(jìn)行專利程序保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏號(hào)分別是 CCTCC NO:V201925和 CTCC NO:V201924。

6、還提供了包含本發(fā)明的減毒非洲豬瘟病毒的疫苗，本發(fā)明的疫苗在受試者中誘導(dǎo)針對(duì)隨后的非洲豬瘟病毒攻擊的保護(hù)性免疫應(yīng)答。

7、疫苗可以包含不同基因型的多種減毒非洲豬瘟病毒。此類疫苗可以能夠誘導(dǎo)針對(duì)多種ASF病毒基因型的交叉保護(hù)性免疫應(yīng)答。

8、還提供了包含一種或多種本發(fā)明的減非洲豬瘟病毒的藥物組合物。該藥物組合物可用于預(yù)防或治療非洲豬瘟。疫苗或藥物組合物可以包含一種或多種本發(fā)明的減毒非洲豬瘟病毒，進(jìn)一步任選地包含一種或多種佐劑，賦形劑，載體和稀釋劑。佐劑可以任何合適的佐劑，化學(xué)類免疫佐劑如氫氧化鋁、弗氏佐劑、礦物油、司鹽等;微生物類免疫佐劑如分枝桿菌、BCC、脂多糖、胞壁酰二肽、胞肽、脂溶性蠟質(zhì)D、短小棒狀桿菌;植物類免疫佐劑多為從植物或大真菌中提取的多糖類，如茯苓多糖、紅花多糖、中草藥類等。而生化類免疫佐劑如胸腺肽、轉(zhuǎn)移因子、白細(xì)胞介素等。優(yōu)選的佐劑可以是納米佐劑生物佐劑，白介素、干擾素等。

9、本發(fā)明的疫苗也可用于聯(lián)合疫苗，如與豬的其他疫苗聯(lián)合，但重點(diǎn)在減毒活疫苗上，尤其是病毒基因的整合，如雙價(jià)苗，三價(jià)苗等。聯(lián)合疫苗可以包含不同基因型的多種減毒非豬瘟病毒，如此可以誘導(dǎo)針對(duì)多種非豬瘟病毒基因型的交叉保護(hù)性免疫應(yīng)答。

10、本發(fā)明的疫苗的施用可以采用方便的途徑，例如肌內(nèi)注射，鼻內(nèi)，口服，皮下，透皮和陰道等途徑。本發(fā)明的減毒疫苗優(yōu)選采用肌肉注射，合適的劑量為102.5-102.5TCID50，優(yōu)選劑量為103-103TCID50。疫苗可以在初免-加強(qiáng)方案后施用。例如，在第一次接種后，受試者可以在一段時(shí)間(例如約7，14，21或28天)之后接受第二次加強(qiáng)施用。通常，加強(qiáng)施用的劑量相同或低于初免施用的劑量。此外，也可以進(jìn)行第三次加強(qiáng)免疫，例如免疫后2-3個(gè)月、6個(gè)月或一年。

11、本發(fā)明獲得的基因缺失的減毒非洲豬瘟病毒具有下述優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明構(gòu)建的兩株基因缺失非洲豬瘟病毒( RASFV△360-eGFP和 RASFV△CD2V/360-eGFP- mcherry)在免疫豬后，即使105 TCID50劑量免疫組動(dòng)物均無(wú)體溫升高等臨床癥狀，血液和臟器病毒分離均為陰性，存活率均為100％，表明其充分致弱，作為疫苗是非常安全的，且均優(yōu)于國(guó)外基因II型ASFV的類似研究。國(guó)外采用我國(guó)流行株同源性極高的 Georgia株構(gòu)建了MGF360-505R基因缺失病毒，在免疫豬后的血液病毒分離陽(yáng)性率在60％以上;采用基因II型 Malawi Li1-20/1株構(gòu)建的CD2V單基因缺失病毒，在免疫豬后血液病毒分離陽(yáng)性率為100％、存活率僅為0％。其次，在有效性方面，強(qiáng)毒攻擊后，本發(fā)明構(gòu)建的 RASFV△360eGFP和 RASFV△CD2V/360-eGFP- mcherry免疫保護(hù)率均為100％，血液病毒分離陽(yáng)性率分別小于35％和100％，但在第21-22天均轉(zhuǎn)為陰性，表明兩株病毒都具有極佳的免疫保護(hù)效力，也明顯優(yōu)于國(guó)外采用基因II型ASFV的類似研究。國(guó)外MGF360-505R缺失Georgial株病毒免疫豬在攻毒后的血液病毒分離陽(yáng)性率為70％。(其中，本發(fā)明采用的103 TCID50免疫劑量小于國(guó)外的104HAD50，但攻毒后血液病毒分離陽(yáng)性率僅為25％):雖然本發(fā)明構(gòu)建的MGF360-505R和CD2V雙基因缺失病毒免疫豬在攻毒后血液病毒分離陽(yáng)性率為100％，略差于MGF360-505R基因缺失的病毒，但顯著優(yōu)于CD2V單缺失的基因II型Malawi Li1-20/1株病毒(免疫后死亡率100％)且攻毒后21天血液病毒分離就轉(zhuǎn)為陰性。最后，本發(fā)明構(gòu)建的兩株基因缺失病毒免疫后21天就能夠提供充分的強(qiáng)毒攻擊保護(hù)優(yōu)于國(guó)外的28天。因此，采用流行地區(qū)的分離株來(lái)構(gòu)建非洲豬瘟基因缺失減毒疫苗是最佳策略，也是中國(guó)研制非洲豬瘟疫苗的關(guān)鍵。因此，本發(fā)明構(gòu)建的基因缺失非洲豬瘟病毒( RASEV△360-eGFP和RASFV△CD2V/360-eGFP- mcherry)具有巨大的應(yīng)用價(jià)值。

經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明所述兩種毒株均能提供對(duì)非洲豬瘟中國(guó)流行強(qiáng)毒株的100％免疫保護(hù)，可作為安全和有效的防控中國(guó)非洲豬瘟疫情的疫苗，具有極大的社會(huì)價(jià)值。

從非瘟疫苗專利消息公布至今，朋友圈早已被刷屏。有的人對(duì)此歡欣鼓舞，有的人卻也存在不同程度的疑惑。

A：疫苗就相當(dāng)于救命良藥。他們不在乎什么毒株不毒株，不在乎專利不專利。他們只想知道疫苗面世還需要多久，售價(jià)多少，畢竟晚一天，損失就多一點(diǎn)。

B：這個(gè)項(xiàng)目的成功不但加快了我國(guó)在非洲豬瘟道路上探索的進(jìn)程，還拓寬了我國(guó)在豬病領(lǐng)域上的版圖。

C：對(duì)于一個(gè)尚未上市的疫苗來(lái)講，從研發(fā)到使用，它需要不斷的優(yōu)化，這可能會(huì)花費(fèi)很長(zhǎng)時(shí)間。即使疫苗成功上市，他們還需要面對(duì)使用疫苗過(guò)后的各種局面。好用，對(duì)有錢(qián)有地的大企業(yè)當(dāng)然是個(gè)好消息，但小散戶被擠壓的局面勢(shì)必會(huì)加重。不好用，那個(gè)非瘟這個(gè)疫病將變得更加復(fù)雜。