為了解全球非洲豬瘟流行形勢(shì),正確認(rèn)識(shí)非洲豬瘟的病原學(xué)和流行病學(xué)特征,防止非洲豬瘟在我國(guó)進(jìn)一步擴(kuò)散和傳播,本文簡(jiǎn)明闡述了非洲豬瘟特有的病原學(xué)特征、主要感染源、傳播途徑以及監(jiān)測(cè)技術(shù)要點(diǎn),分析了需特別關(guān)注的4種傳染源,供相關(guān)人員參考,以便及早根除國(guó)內(nèi)的非洲豬瘟疫情,保障我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)健康發(fā)展。
2018年8月3日,沈陽(yáng)市沈北新區(qū)某豬場(chǎng)證實(shí)發(fā)生ASF疫情。這是我國(guó)首次發(fā)生ASF。此次疫情引起了國(guó)內(nèi)外高度關(guān)注。如何正確認(rèn)識(shí)ASFV病原學(xué)特征和流行規(guī)律成為當(dāng)務(wù)之急。本文結(jié)合國(guó)內(nèi)外ASF研究進(jìn)展,闡述了ASFV病原學(xué)特征、流行病學(xué)特征、診斷要點(diǎn),分析了國(guó)內(nèi)需要特別關(guān)注的幾種傳染源,以期為采取有效措施,防范、控制和清除ASF提供參考。

全球ASF流行概況
全球ASF流行大體可以分為三個(gè)階段。
第一階段,主要在非洲大陸暴發(fā)和流行。1921年,非洲肯尼亞最早報(bào)道ASF發(fā)生,隨后非洲南部、中部和東部先后發(fā)生ASF疫情,至今非洲中南部仍是非洲豬瘟的主要疫區(qū)。
第二階段,ASF傳出非洲大陸進(jìn)入歐洲和南美洲。1957年ASF首次傳出非洲大陸,在葡萄牙的里斯本地區(qū)發(fā)生。隨后西班牙、法國(guó)、意大利、荷蘭等西歐國(guó)家陸續(xù)發(fā)生ASF疫情。通過撲殺等措施,到20世紀(jì)90年代,除意大利撒丁島外,歐洲基本清除了ASF。1971年南美洲的古巴首次報(bào)道ASF,隨后巴西、多米尼加等國(guó)也報(bào)道有ASF疫情發(fā)生。
第三階段,ASF傳入東歐和俄羅斯。2007年ASF經(jīng)輪船泔水長(zhǎng)距離傳播至東歐的格魯吉亞,繼而傳播到阿塞拜疆、亞美尼亞、波蘭、立陶宛、白俄羅斯、俄羅斯等,至今仍在局部暴發(fā)和流行。2018年以來,中東歐國(guó)家通報(bào)發(fā)生的ASF疫情就有2710起。2017年俄羅斯通報(bào)發(fā)生160起ASF疫情,其中俄羅斯遠(yuǎn)東地區(qū)發(fā)生疫情的伊爾庫(kù)茨克州還是重要的商貿(mào)樞紐,與我國(guó)的交通貿(mào)易非常頻繁,對(duì)我國(guó)形成了極大威脅。
ASFV特有的病原學(xué)特征
存活時(shí)間長(zhǎng),抵抗力強(qiáng)
ASFV屬于雙鏈DNA病毒目非洲豬瘟病毒科非洲豬瘟病毒屬。該屬目前僅有一個(gè)ASFV病毒種。ASFV的基因組為單分子線狀DNA,長(zhǎng)度約170~190 kb。ASFV個(gè)體較大,直徑可達(dá)200nm,表面為二十面體結(jié)構(gòu)和一層含類脂的囊膜,因此高溫和一些破壞囊膜的消毒劑均可有效殺滅ASFV。但是由于其復(fù)雜的分子結(jié)構(gòu),ASFV對(duì)消毒劑的抵抗力較其他的囊膜病毒稍強(qiáng),特別是在一些豬肉制品或血液中存活時(shí)間更長(zhǎng)。據(jù)報(bào)道,ASFV在干腌火腿中的感染性可持續(xù)140d,在帕爾馬火腿中的感染性可持續(xù)300~399d,在血液、糞便和組織中存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)半年,在生肉或者未完全煮熟的豬肉制品中存活時(shí)間長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月。這就導(dǎo)致ASFV一旦傳入,往往在疫源地長(zhǎng)期存在,造成二次或次級(jí)感染。
基因組龐大,易變異
ASFV基因組龐大,且差異較大。有的毒株致病性很強(qiáng)(E75),有的則較弱(細(xì)胞適應(yīng)毒BA71V)。研究發(fā)現(xiàn),在ASFV基因組的保守區(qū),不同毒株的左端48 kb和右端22kb存在較大差異,這可能是ASFV毒力存在差異較大的主要原因。與痘病毒和虹彩病毒類似,ASFV也屬于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)增殖的病毒。到目前為止,已經(jīng)測(cè)定至少11株ASFV的全基因組序列,分析其結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn),ASFV基因組至少含有151~167個(gè)ORFs,至少110個(gè)ORFs在11株ASFV中都高度保守。在ASFV的包裝和侵染過程,至少有pp220、pp62、p72、p54、p30、CD2V、p10、p14.5、p17等50種蛋白參與。其中pp220分子質(zhì)量為281.5 ku,在病毒感染過程中屬于晚期表達(dá)蛋白,由基因CP2475L編碼,在S273R酶的作用下裂解為p150、p37、p14和p34等成熟的病毒蛋白;pp62的分子質(zhì)量為60.5ku,由基因CP530R編碼,在S273R酶的作用下裂解為p35和p15等成熟的病毒蛋白;p150、p37、p14、p34、p35和p15等蛋白在病毒衣殼的組裝過程中起關(guān)鍵作用。P72的相對(duì)分子質(zhì)量為73.2ku,由基因B46L(VP72)編碼,是病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白和核心抗原蛋白,是病毒二十面體的主要成分。
目前很多檢測(cè)ASFV的PCR、熒光PCR方法等都是基于VP72基因建立的。研究顯示,ASFV的基因組變異非常頻繁,根據(jù)編碼p72基因的C端序列可以將ASFV至少分為24個(gè)基因型,進(jìn)一步根據(jù)p54和PB602L基因的中央可變區(qū)(CVR)序列,ASFV的分型數(shù)量會(huì)更多。
ASFV主要感染源與傳播途徑
ASFV宿主是家豬和野豬,主要通過間接和直接接觸傳播。發(fā)病豬、隱性感染豬及其排泄物和污染物以及軟蜱等媒介吸血昆蟲都是ASFV的傳染源,這也是ASF不易清除的主要原因。
軟蜱
在非洲,野豬-軟蜱-野豬形成的“森林循環(huán)”比較常見。一些疣豬ASF感染率較高,軟蜱叮咬后,病毒可長(zhǎng)期在軟蜱體內(nèi)存活,再通過叮咬野豬進(jìn)入下一個(gè)循環(huán),從而導(dǎo)致“森林循環(huán)”長(zhǎng)期穩(wěn)定存在。
野豬
野豬與家豬的接觸是ASFV的另一個(gè)重要的傳染源。野豬在野外適應(yīng)性很強(qiáng),喜歡高密度群居生活,導(dǎo)致野豬之間很容易通過直接接觸傳播本病。有些野豬還經(jīng)常出沒于農(nóng)戶田舍周圍,與家豬接觸密切。一旦ASFV在野豬中定殖,則會(huì)形成一個(gè)移動(dòng)傳染源,加上野豬活動(dòng)性隱蔽,活動(dòng)范圍大,短期內(nèi)很難清除。
餐余垃圾及非生物媒介
帶毒的餐余垃圾是一個(gè)很重要的感染源。巴西、葡萄牙等首次暴發(fā)的ASF疫情都是有交通工具攜帶的餐余垃圾喂豬引起的。此外,一些污染的衣服、鞋子、車輛、設(shè)備等非生物媒介也可以傳播ASFV。
ASFV監(jiān)測(cè)與滅源
由于ASFV在外界環(huán)境中存活時(shí)間長(zhǎng),對(duì)普通消毒劑抵抗力強(qiáng),病毒基因型多,易變異,無有效疫苗預(yù)防,因此ASF在沈陽(yáng)市的暴發(fā),對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)是一種巨大威脅。考慮到ASFV的潛伏期長(zhǎng)達(dá)15 d,再加上現(xiàn)代發(fā)達(dá)的物流業(yè),15 d的時(shí)間足以讓處于潛伏期內(nèi)的豬到達(dá)國(guó)內(nèi)所有地區(qū),造成疫情大面積擴(kuò)散和傳播。另外,ASFV的傳播方式多樣,當(dāng)前尚無有效疫苗,因此國(guó)內(nèi)防控本病的最主要措施就是監(jiān)測(cè)和滅源。
監(jiān)測(cè)要點(diǎn)
臨床檢查。ASF根據(jù)臨床表現(xiàn)可以分為最急性、急性、亞急性和慢性等4種類型。最急性非洲豬瘟往往不表現(xiàn)典型癥狀,有時(shí)豬剛出現(xiàn)精神沉郁、飲食下降后,第2~3天就突然死亡。急性非洲豬瘟在臨床上的表現(xiàn)主要是高燒,肢體末端出血性紫斑,病理變化為主要臟器的出血和淋巴結(jié)腫大,如脾臟嚴(yán)重腫大出血、肺臟腫大出血、膀胱出血、心內(nèi)膜出血、胃和腸黏膜出血,頜下淋巴結(jié)、腹腔淋巴結(jié)、腸系膜淋巴結(jié)等腫大出血。臨床上一頭豬不一定能全部顯現(xiàn)出所有癥狀,但多剖檢幾頭基本上可以看到這些癥狀。因此,在臨診上排除ASF疑似病例時(shí)要慎重,不可輕易放過任何一個(gè)可疑病例。另外,ASF很容易與古典豬瘟和高致病性豬藍(lán)耳病引起的病變相混淆,所以在臨床診斷和病理剖檢時(shí)要注意鑒別。
實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。目前,如果臨床上發(fā)現(xiàn)類似豬瘟或者高致病性豬藍(lán)耳病病例時(shí),一定要進(jìn)行ASF排查,一旦發(fā)現(xiàn)可疑樣品,就必須進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)?,F(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法主要有血清學(xué)方法和病原學(xué)方法。血清學(xué)方法主要有間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、阻斷酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)和間接熒光抗體試驗(yàn)等,其中酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)已經(jīng)有商品化的試劑盒出售。
ASFV的病原學(xué)方法也有很多,如病毒的細(xì)胞培養(yǎng)和分離、直接免疫熒光法、雙抗體夾心ELISA法、普通PCR和熒光PCR方法等,其中OIE推薦的普通PCR和熒光PCR方法最為常用。我國(guó)《非洲豬瘟防治技術(shù)規(guī)范(試行)》中提到了3種ASFV病原學(xué)檢測(cè)方法:雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)和實(shí)時(shí)熒光聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(OIE官方網(wǎng)站都有這些方法詳細(xì)操作步驟)。除此以外,還要加大ASF防控技術(shù)研制工作力度,盡快開發(fā)簡(jiǎn)易、高效、特異的診斷試劑和診斷方法,并能夠與古典豬瘟、高致病性豬藍(lán)耳病等其他豬群疫病相鑒別。
需特別關(guān)注的幾種傳染源
用來喂豬的泔水。泔水是來自城市的飯店、餐館、工廠餐廳等的餐余垃圾。一直以來,泔水喂豬作為處理餐余垃圾的方法很受小型養(yǎng)殖戶歡迎。這種養(yǎng)殖模式在部分城市城鄉(xiāng)結(jié)合部較多,感染疫病風(fēng)險(xiǎn)極高。如果飯店中使用的豬肉攜帶ASFV,由于病毒存活時(shí)間較長(zhǎng),ASFV就會(huì)隨泔水飼喂而感染豬群,因此泔水是傳播ASFV的重要傳染源。
屠宰場(chǎng)。如果感染ASFV的病豬進(jìn)入待宰間,會(huì)通過糞便、尿液以及直接接觸等將ASFV傳遞給健康豬群并能在待宰間長(zhǎng)期存在。當(dāng)感染ASFV的豬進(jìn)入屠宰間后,屠宰時(shí)產(chǎn)生的糞便、血液等會(huì)污染屠宰間,屠宰中使用的刀具、車間流水間、屠宰工人等都可以使豬肉制品污染ASFV,從而使屠宰場(chǎng)成為ASFV的傳染源。
生豬肉制品。ASFV可在生肉或者未完全煮熟的豬肉制品中存活3個(gè)月,一旦污染豬肉,則會(huì)通過銷售而污染其他生豬肉,從而導(dǎo)致病毒向外傳播,并通過泔水飼喂感染健康豬群,導(dǎo)致疫情發(fā)生。
生豬販運(yùn)人或經(jīng)紀(jì)人。一些小型養(yǎng)殖戶經(jīng)常任由豬販子或經(jīng)紀(jì)人到自己豬場(chǎng)選豬。這些人在不同的豬場(chǎng)和豬舍內(nèi)隨意來回走竄,導(dǎo)致病原在不同的豬場(chǎng)之間相互傳播。
小結(jié)
ASFV在外界環(huán)境中存活時(shí)間長(zhǎng),對(duì)普通消毒劑抵抗力強(qiáng),導(dǎo)致難以清除;病毒基因型多,易變異,導(dǎo)致無有效疫苗預(yù)防;感染源和傳播途徑多,可長(zhǎng)距離傳播,導(dǎo)致防控難度大。因此防控本病的最主要措施就是監(jiān)測(cè)和滅源。需要通過嚴(yán)格控制泔水喂豬以及屠宰場(chǎng)、生豬肉制品、生豬販運(yùn)人或經(jīng)紀(jì)人等4種傳染源,防止疫情擴(kuò)散;通過臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)研發(fā)與培訓(xùn),加強(qiáng)監(jiān)測(cè),及早發(fā)現(xiàn)疫情。
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